免试剂离子色谱法测定肉制品中的多聚磷酸盐

免试剂离子色谱法测定肉制品中的多聚磷酸盐

1.免试剂离子色谱法测定肉制品中的多聚磷酸盐 篇一

食品中磷酸盐多采用紫外分光光度计进行检测, 然而采用该方法, 前处理是进行全消解, 检测到的是样品中总磷, 而无法真正表征磷酸根的含量。本试验室采用氢氧化钠提取薯片中的磷酸盐, 离子色谱电导检测器进行检测, 优化淋洗液条件, 有效地分离薯片中的杂质, 准确真实地检测薯片中磷酸根的含量。

1 试验

1.1 仪器和试剂

ICS-3000离子色谱系统 (美国Dionex公司) ;自动进样器及Chromeleon色谱数据处理工作站;阴离子交换分离柱:包括Ion Pac AS11HC分析柱 (250mm×4mm) 和AG11HC保护柱 (50mm×4mm) ;Mili Q-Element纯水机 (法国Millipore) ;KQ-500E型超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司) ;On Guard II RP萃取小柱 (1cc, 美国戴安公司) ;0.45μm尼龙滤膜

磷酸二氢钠基准物质 (纯度99.0%, 购至北京化工厂) 。氢氧化钠 (优级纯, 购至北京化工厂) 。超纯水 (Millipore超纯水器制备) 。

1.2 色谱条件

流动相为氢氧化钾淋洗液发生器 (EG) 产生氢氧化钾淋洗液 (KOH) :0~30min, 浓度10mmol/L升至30mmol/L;30~35min, 浓度70mmol/L;35~40min, 浓度10mmol/L;流速为1.0m L/min;色谱柱温度为30℃;检测器为电导检测器;进样量为100μL。应用上述条件, 取质量浓度为10.2mg/L的磷酸根标准品溶液进样, 色谱图如图1所示, 磷酸根约在26min出峰。

1.3 样品前处理

称取粉碎好的薯片样品约1g, 加入约100mL浓度为10mmol/L氢氧化钠溶液, 超声提取15min, 过滤, 滤液加入5mL三氯甲烷去除油脂。吸取水相过1.0cc On Guard RP柱除去样品中脂肪和蛋白质, 然后进样检测。On Guard RP柱在使用前依次用5m L甲醇和10mL水活化, 放置20min后使用。和0.45μm的尼龙滤膜后待用。同时做试剂空白。

2 结果与讨论

2.1 薯片前处理条件的确定

磷酸盐易溶于水, 试验室采用淋洗液 (氢氧化钾溶液) 作为提取溶液, 就能有效地提取样品中的磷酸盐。提取液中还有少量的脂肪和蛋白, 如果在进入色谱柱之前不能有效去除, 则可能对色谱柱造成不可逆的伤害。如何去除这些杂质是前处理中的难点。根据相似相容的原理, 试验室采用三氯甲烷作为脂肪萃取溶液。再采用On Guard RP小柱去除其他的蛋白和由于三氯甲烷与水的互溶性而带入的有机物。经除杂后的样液澄清透明, 能满足试验的需要。

2.2 色谱条件的选择

磷酸根是易极化阴离子, 与常规检测的阴离子 (氟、氯、硫酸根和硝酸根) 相比疏水性强, 保留时间较长。薯片含有大量的调味料, 在采用碱性溶液提取的过程中小分子有机酸也同时被提取, 如果采用常规的阴离子检测的方法, 在磷酸根出峰的位置会有很多杂峰影响磷酸根的定量。

本试验采用了梯度淋洗来完成磷酸根与其他杂质离子的分离。在0~30min的过程中, 从10mmol/L的KOH浓度慢慢的升为30mmol/L, 并在磷酸根出峰后, 使用70mmol/L高浓度的KOH淋洗液冲洗5min的色谱柱, 将吸附在色谱柱上的强保留性的物质洗脱下来, 然后回到起始浓度平衡5min。

2.3 线性范围、检出限及回收率

配制磷酸根质量浓度为0.10、0.50、2.50、5.00和10.00mg/L的系列标准品溶液, 按照1.2中的色谱条件进样检测, 并以标准品质量浓度 (X) 为横坐标, 峰面积 (Y) 为纵坐标作图, 同时用最小二乘法进行线性回归, 得标准曲线回归方程为Y=0.2112X+0.0158 (r=0.9988) , 在质量浓度为0.10~10.0mg/L范围内, 标准品质量浓度与峰面积值具有良好的线性关系。

将标准品溶液稀释进样, 以信噪比为10 (S/N=10) 计算, 磷酸根的最低检出质量浓度为0.1mg/L, 按1.3中样品处理方法, 薯片中磷酸根最低检出限为10.0mg/L。

对薯片样品进行加标回收试验, 回收率均在87.3%~110.2%之间, 对于薯片样品进行6次平行进样, RSD小于4.2%, 重现性良好 (见表1) 。

2.4 样品检测

利用本文建立的方法对购自零售市场的几种品牌的薯片进行了检测, 该方法对这些样品均具有良好的适用性, 色谱无干扰 (见图2) 。同时采用微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法对薯片中的总磷进行检测, 而薯片中实际磷酸根的含量远远小于样品中总磷的含量 (见表2) , 要想真正表征薯片中所添加的磷酸盐的含量, 离子色谱法完全能满足要求。

3 结论

本文建立了薯片样品中磷酸根的检测方法, 并用精密度和加标回收等指标对方法的准确性进行了验证, 该方法精密度好, 准确度高, 完全能满足试验的要求。并与总磷的检测结果进行了对比, 要正确的表述样品中磷酸盐的含量, 离子色谱法为一个很好的选择。

参考文献

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