细胞增殖教案

细胞增殖教案（精选14篇）

1.细胞增殖教案 篇一

一、教材分析

(一)教材的地位与作用

《细胞通过分裂而增殖》选自《生物学》(北师大版)七年级上册第二单元第三章第三节。本节内容讲述细胞增殖是一种生命现象，体现了微观生物学知识。在学生掌握了细胞的结构和功能的基础上，本节课主要围绕“细胞体积为什么这么小?”这个问题展开教学，使学生在探究活动中理解细胞不能无限增大的原因，并为第二课时的教学提供平台，埋下伏笔。

(二)教学目标

根据初中生物课程的指导思想和新课程标准的的四项要求：①提高生物科学素养;②面向全体学生;③倡导探究性学习④注重与现实生活的联系。制定以下几个方面的教学目标。

1.认知目标：(1)解释细胞保持较小体积的主要原因;

(2)通过模型方法进行生物学的研究。

2.能力目标：(1)尝试利用数学方法探究细胞生长极限的问题;

(2)运用数学方法分析、归纳、推理、处理实验数据，得出细胞表面积与体积关系的规律。

3.情感与价值目标：(1)让学生体验模型实验法对获得知识和理解知识的重要作用; (2)让学生认同实事求是的科学态度，学会用批判性思维方法解决问题。

(三)教学重点、难点

重点: 通过两个活动来研究“细胞的体积为什么这么小?”的问题。

难点：活动“研究细胞体积与细胞表面积的关系”中学生提出预测、处理数据、得出结论。

二、学情分析

七年级学生刚步入中学，思维活跃，敢于质疑和讨论，具备一定的逻辑思维能力，但还不能完全离开实物的支持，且以往学习中较少涉及到细胞知识，同时学生在学习过程中由于观察、操作和分析能力的差异会产生不同层次的学习效果。而且七年级学生对“细胞大小与外界物质扩散的关系”的理解有一定难度，因此本节课设想通过教师引导，学生自主学习探究活动，来提高课堂效率。

三、教学策略

(一)教学用具

教具形式：制作教学课件;准备实验材料：酚酞琼脂块、氢氧化钠溶液、毫米尺。

使用方式：教师展示课件，指导学生用实验材料按活动二的目的要求探究细胞大小与物质扩散的关系。

效果预测：引起学生的兴趣，促进学生积极参与课堂活动，使他们由生动形象的感性知识逐步过渡到对抽象知识的理解。

(二)教法

依据：建构主义教学理论 (引导探究型学习，做中求学)

(直观教学法、比较归纳法、反馈法等)

①直观教学法：通过多媒体辅助教学，化静为动，化抽象为具体，增强了教学内容的直观性、启发性，使学生更好地从感性认识上升为理性认识。

②实验探究法：指导学生主动参与两项探究活动，锻炼学生的实验探究技能。

③通过师生互动，生生互动，对所获得数据和提出的问题进行分析、讨论、交流、处理，共同得出结论。

④课堂习题检测使教师发现问题，及时补充，进行教学反馈。

(三)学法

(观察法、讨论法、归纳分析法等)

本节内容理论性强、抽象复杂，所以课前要指导学生做好预习，课堂上让学生积极参与到教学活动中，使学生在动手操作，动脑思考中解决问题。

①指导学生以“细胞体积为什么这么小?”这一问题为主线，让学生进行自主探究。

②指导学生运用逻辑思维的方法处理分析实验数据,理解细胞体积与细胞表面积的关系。

③指导学生采用发散性思维的方法，联想的方法将模拟实验结果迁移到真实细胞，从而得出结论。

(四)重难点突破策略

重点的落实方案：教学中通过设置情景，引出问题“细胞的体积为什么这么小”引导学生思考、讨论。展示课件进行直观教学，组织学生参与探究活动，在实际操作中理解较小的细胞与其物质代谢的关系。

难点突破策略：教师逐步质疑和引导，通过学生动手实验，动脑思考，参与发现问题和解决问题的过程，从而得出结论。

2.细胞增殖教案 篇二

氯化锂对人体具有广泛的生理活性, 其活性涉及神经、免疫、内分泌、血液等组织系统。另有研究表明氯化锂是糖原合成酶激酶3β (glycogensynthase kinase 3β, GSK 3β) 的高度选择性抑制剂[1], 糖原合成酶激酶3β是一种丝/苏氨酸蛋白激酶, 参与许多细胞生命的过程。新近研究显示, 氯化锂可通过抑制GSK 3β从而减少化疗药物所致的细胞凋亡, 即氯化锂可能促进肿瘤细胞的生长[2], 但亦有与此相反的结论, 氯化锂能抑制肿瘤细胞增殖并导致周期阻滞[3]。但关于LiCl对人类胃癌细胞系MGC 803有何作用尚未见文献报道。本文在体外研究LiCl对MGC 803胃癌细胞增殖和细胞周期的影响, 以观察一定浓度的LiCl对MGC 803细胞增殖和周期的作用。

1材料和方法

1.1实验细胞

MGC 803细胞为人胃低分化粘液癌, 由内蒙古医学院分子生物学研究中心提供。

1.2试剂

RPMI—1640培养基 (CIBCO, USA) 4℃保存。小牛血清 (FBS) 灭活后分装, -20℃冻存。LiCl, 用1640配成1.0mol/L贮存液, 4℃保存。PI (碘化丙啶) MTT (美国SigmaCo.) 用PBS配成5mg/mL浓度。

1.3方法

1.3.1细胞培养

MGC 803细胞培养于含10%新生小牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的RPMI—1640培养液中, 置于37℃, 湿化的5%CO2孵箱中培养。每 (1～2) d更换培养液, 每周按1∶3比例传代 (用0.25%的胰蛋白酶) 1次。待培养的MGC 803细胞生长至70%～90%汇合状态时进行无血清化及加药 (LiCl) 处理, 每次实验均采用同一代细胞, 并用不同批次的细胞重复实验。

1.3.2 MTT比色法检测细胞增殖

以约5×103个/孔密度将等量细胞接种于96孔板上培养24h后, 处理组分别加入含不同浓度LiCl (10、20、40mmol/L) 的新鲜无血清培养液, 未处理组加入等量RPMI 1640培养基, 每个浓度平行接种3孔, 再培养24h后每孔加入5mg/mLMTT 20μL及PBS100μL, 37℃, 5%CO2, 饱和湿度培养4h后去除上清, 加入100μLDMSO, 充分振荡溶解甲瓒颗粒后用酶标仪 (波长570nm) 测定各孔的OD值, 实验重复3次。

1.3.3流式细胞术检测细胞周期

以10、20、40mmol/LLiCl作用MGC 803细胞24h后, 将MGC 803细胞分别进行消化, 制成细胞悬液, 计数达到 (1～5) ×106个/mL, 离心 (1 000r/min, 5min) 弃去培养液;PBS洗1次;离心 (1 000r/min, 5min) 弃去PBS, 加入-20℃预冷的70%乙醇, 置于-20℃固定过夜。上机前离心 (1 000r/min, 5min) 弃去固定液, PBS重悬5min×2次, 离心 (1 000r/min, 5min) 后弃去PBS;采用PI染色液, 室温避光染色5min后上样, 每个样本获得2.0×104个细胞, FACSCalibur型流式细胞仪检测MGC 803细胞在细胞周期各时相所占的百分比。每组实验重复3次。

1.4统计学分析

实验数据以表示, 采用SPSS 12.0统计分析软件进行单因素方差分析 (OnewayANOVA) 。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 LiCl对MGC 803细胞MTT值的影响

MGC 803细胞与不同浓度的LiCl培养24h后, 结果显示处理组的MTT值显著低于未处理组, 并呈剂量依赖关系 (图1) 。

2.2 LiCl导致MGC 803细胞周期阻滞于G2/M期

流式细胞术分析细胞周期变化结果显示, 不同浓度的LiCl处理MGC803后, S期细胞减少, G2/M期细胞增多, 与对照组比较差异有显著性 (P<0.05) (图2) 。

3 讨论

早期, LiCl被用于治疗狂燥型的精神病, 在治疗的过程中人们对LiCl治疗疾病的作用机制进行了大量研究, 认为主要与以下几个机制有关:①锂阻断磷脂酰肌醇循环[4], 用以治疗精神系统疾病;②锂直接抑制糖原合成酶-3β (GSK3β) 而活化Wnt信号途径[5];③抑郁性神经症和躁狂症的患者血中5-羟色胺 (5-HT) 降低, 锂能降低去甲肾上腺素的活性, 增加5-羟色胺的释放[6], 起到治疗作用;④锂提高谷氨酸转运体的功能[7]等。有研究者证实在肝癌细胞[8]、原代培养的牛主动脉内皮细胞[9]中, LiCl能使细胞阻滞于G2/M期进而抑制细胞生长, 此作用在一定范围内呈剂量效应关系。然而, LiCl对细胞生长和细胞周期进展的影响可能随细胞类型的不同而不同。但未见LiCl对人类胃癌细胞系MGC803细胞作用的报道。

本实验用不同浓度的LiCl刺激MGC803细胞株, 24 h后进行细胞增殖活性及细胞周期分析。发现LiCl能明显抑制MGC803细胞的增殖, 并呈剂量依赖关系, 使得细胞发生G2/M期阻滞。这种细胞增殖抑制作用可能与糖原合成酶激酶3β有关[10]。GSK3β是一种多功能的丝/苏氨酸磷酸激酶, 能磷酸化抑制或降解许多底物, 包括与调节细胞增殖有关的Cyclin D1蛋白及转录因子β-catenin等[11]。抑制GSK3β的功能将促进这些转录因子的活化, 从而促进相应基因的转录。作为GSK3β的特异性抑制剂, LiCl被广泛用于研究GSK3β的功能。本实验表明, LiCl减慢MGC803细胞增殖, 导致G2/M期阻滞, 提示在胃癌细胞中抑制GSK3β的功能具有抗肿瘤的作用, 但有关的信号通路不明, 其意义和分子机制有待进一步研究。

摘要：研究氯化锂 (LiCl) 在体外对MGC803胃癌细胞增殖及周期的影响, 以不同浓度的LiCl作用MGC803细胞24h后, 采用四甲基偶氮唑盐 (MTT) 比色法检测各组细胞的增殖活性, 利用流式细胞术进行细胞周期分析。结果:①不同浓度的LiCl (10、20、40mmol/L) 均对MGC803细胞具有抑制增殖的作用, 这种增殖抑制作用呈剂量依赖关系。②随着LiCl浓度的升高, 发生G2/M期阻滞, 与正常对照组相比, 差异具统计学意义。说明LiCl能抑制MGC803胃癌细胞增殖和导致G2/M期阻滞。

关键词：氯化锂,MGC803细胞系,细胞增殖,细胞周期

参考文献

[1]Zhan G F, Phiel C J, Spece L, et al.Inhibitory phosphorylation of gly-cogen synthase kinase-3 (GSK-3) in response to lithium:evidence for autoregulation of GSK-3.J Biol Chem, 2003;278 (35) :33067—33077

[2]Beurel E, Kornprobst M, Blivet-Van Eggelpoel MJ, et al.GSK-3beta inhibition by lithium confers resistance to chemotherapy-induced ap-optosis through the repression of CD95 (Fas/APO-1) expression.Exp Cell Res, 2004;300 (2) :354—364

[3]Gould TD, Gray N A, Manji HK.Effects of a glycogen synthaseki-nase-3inhibitor, lithlum, in adenomatous polyposis colimutant mice.Pharmacol Res, 2003;48 (1) :49—53

[4]Shaldubina A, AgamG, Belmaker R H.The mechanismof lithiumac-tion:state of the art, ten years later.Prog Neuropsy Chopharmacol Bi-ol Psychiatry, 2001;25 (4) :855—866

[5]Chen R H, Ding W V, McCorinick F.Wnt signaling to beta-catenin involves two interactive components.glycogen synthase kinase-3beta inhibition and activation of protein kinase C.J Biol Chem, 2000;275 (23) :17894—17899

[6]Haddjeri N, Szabo S T, De Montigny, et al.Increased tonic activation of rat forebrain5-HT (1A) receptors by lithiumaddition to antidepres-sant treatments.Neuropsychopharmacology, 2000;22 (4) :346—356

[7]Dixon J F, Hokin L E.Lithium acutely inhibits and chronically up-regulates and stabilizes glutamate uptake by presynaptic nerve endings in mouse cerebral cortex.Proc Natl Acad Sci USA, 1998;95 (14) :8363—8368

[8]Eedal E, Ozturk N, Cagata T, et al.Lithium-mediated downregulation of PKB/Akt and cyclin E with growth inhibition in hepatocellular car-cinoma cells.Int J Cancer, 2005;115 (6) :903—910

[9]Mao C D, Hoang P, Dicorleto P E.Lithiuminhibits cell cycle progres-sion and induces stabilization of P53in bovine aortic endothelial cells.J Biol Chem, 2001;276 (28) :26180—26188

[10]Rao AS, Kremenevskaja N, Resch J, et al.Lithiumstimulates pro-liferation in cultured thyrocytes by activating Wnt/beta-catenin sig-naling.Eur J Endocrinol, 2005;153 (6) :929—938

3.《细胞增殖》第1课时 篇三

（一）教学内容的地位

《细胞增殖》是高中生物必修教材第二章《生命活动的基本单位——细胞》中第二节内容，它是建立在已经学习第一节《细胞结构和功能》，掌握了细胞的基本结构及功能的基础之上来学习该节内容，同时，为学习第五章《生物的生殖、发育》中减数分裂和第六章《遗传和变异》中遗传的基本规律知识奠定基础，起到了承前启后的作用，并且是历年来高考的重要考点，在近五年的各地高考试卷中，总分达47分，具有十分重要的作用。

（二）教学目标

1、知识目标

知道细胞增殖的方式、意义以及无丝分裂的过程和特点。

识记有丝分裂细胞周期的概念；动植物细胞有丝分裂过程的异同点；有丝分裂的特征和意义。

应用有丝分裂过程各时期的特点。

2、能力目标

1）凭借有丝分裂过程图、图文结合，培养学生的识图能力，形象思维能力。

2）运用坐标曲线归纳出有丝分裂过程中染色体数目DNA含量变化，培养学生的分析能力。

3）情感目标

细胞分裂——运动是物质的根本属性，建立生命活动的唯物主义观点。

（三）教学重点、难点

1、教学重点

真核细胞有丝分裂的细胞周期的概念和特点以及真核细胞有丝分裂的过程。

2、教学难点

真核细胞有丝分裂过程中，各个时期染色体的变化特点。

二、教学对象分析

首先，作为高二的学生，已经具备了一定的阅读能力、自学能力，对于一些基础知识可由其自学；其次，生物这门学科是高二初开的一门学科，学生对其学习的方法和技巧欠缺，有关生物的基础知识积累少；第三，激发学生对于生物这门学科的学习兴趣也很重要。

三、教学时间安排

由于学生实际情况，加之本节内容知识点多，学生理解较为困难，因而教学时间安排为3课时（讲授2课时，实验1课时），本次说课内容仅限于第1课时（内容：细胞增殖方式、意义；有丝分裂细胞周期的概念，植物细胞有丝分裂过程）。

四、教法和学法

学生是教学的主体，让学生积极参与到探求知识的过程中，主动去获取知识，这是现代教学理念的基本观点，因而，在本课教学中，采用自学法、讨论法和讲授法相结合，以问题贯穿本堂课，激发学生的求知欲，充分利用插图、挂图、坐标图，把抽象、微观的有丝分裂过程，形象、生动的展现在学生眼前，通过学生自己的阅读、比较、归纳获取知识，培养学生的识图能力、分析能力。

五、教学过程

（一）新课引入

回忆第一节学习了细胞的结构和功能，细胞是生命活动的基本单位，但大多数生物是由很多细胞构成，细胞的数目是如何增殖的呢？引入细胞增殖、板书课题（通过简洁地提问，引入新课，激发起学生的求知欲）。

（二）新课学习

1、细胞增殖的方式、意义

提问：细胞以什么方式增殖，真核细胞的分裂方式有几种？哪几种？增殖有何意义？

阅读教材第一、二自然段，并思考提出的问题，在教材中勾划出相关内容。给2分钟时间，抽同学回答并点评。（培养学生的自学能力，语言表达能力）

2、有丝分裂

有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式，用以增加体细胞数量，体细胞进行有丝分裂具有周期性，也就是具有细胞周期引出。

1）细胞周期

细胞周期的概念是什么？请同学阅读教材，并引导学生分析概念，是不是所有在分裂的细胞都有细胞周期？一个细胞周期的起点在哪儿？止点在哪儿？（以问题促进学生思考，培养学生的问题意识，进行探究学习，突破重点）

然后阅读插图2-19有丝分裂细胞周期图，引导学生得出一个细胞周期包括两个阶段：分裂间期和分裂期，结合起止点，知道分裂间期在前，分裂期在后，从弧线的长短上得出时间的长短，并用表2-1不同细胞的细胞周期持续时间来反证。追问：各阶段有何特点？对于植物细胞和动物细胞而言，它们是否一样？我们先分析植物细胞有丝分裂的特点引出：

2）植物细胞有丝分裂各时期的特点。

①分裂间期

利用挂图指出间期图例，观察结构，提问是不是间期就是“间歇期”？讲述完成DNA复制和有关蛋白质合成，回忆染色质的主要成分，说明实质是进行染色体复制，但并未分开仍由一个着丝点连在一起，画图 ：由一个着丝点连着的两结构称为姐妹染色单体，染色体数目不变。

②分裂期

人为地分为了四个时期：前、中、后、末。

前期：比较挂图上间期与前期的区别，学生自由交流。

老师归纳两出现两消失，中期：与前期比较，后期：与中期比较，末期：与后期比较。

依次进行，指导学生重点在于分析染色体的变化，老师用一、二句精炼的话归纳，并在黑板上画出特点（让学生把不易看见的变化与看得见的图结合起来，抓住特点，便于记忆，理解、突破重点、难点）。

然后，老师与学生一起对照挂图来描述变化过程，学生复述（通过重复强化学生记忆过程）。

分裂中染色体和DNA数量变化有何规律？用坐标图来反映，老师建立一个坐标图，引导学生据过程一起分析，得出染色体变化曲线。练习，由学生自己按照上述思路绘DNA变化曲线，抽一位同学到黑板前绘制，其他同学在草稿纸上绘，最后点评。（用坐标图更能直观反映出变化过程，引导学生分析，并知道变化规律的由来，加深对过程的理解，让学生积极参与到获取知识的过程中体验快乐）

（三）小结

指出重难点：细胞周期的概念，各时期的特点。（让学生明确需要掌握的内容）

（四）作业布置

预习动物细胞有丝分裂的过程，思考动物细胞有丝分裂与植物细胞有丝分裂有何异同。

（五）板书设计

第二节细胞增殖

一、细胞增殖方式、意义

二、有丝分裂

1、细胞周期

2、植物细胞有丝分裂过程

①分裂间期：DNA复制，有关蛋白质合成，形成姐妹染色单体

②分裂期有：

前：两出现，两消失

中：着丝点排在赤道极上

后：着丝点分裂，拉向两极

4.1 细胞的增殖 教学设计 教案 篇四

1.教学目标

1、知识目标

（1）模拟探究细胞大小与物质运输的关系，探讨细胞不能无限长大的原因。（2）举例说明细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。（3）简述细胞的生长和增殖的周期性。（4）观察细胞的有丝分裂并概述其过程。

2、能力目标

（1）尝试用模拟的方法进行科学研究。

（2）运用数学分析、归纳和推理方法处理和分析实验数据。（3）通过学习有丝分裂过程培养学生分析图像、解读图像的能力。（4）学习用曲线图描述DNA和染色体数量的变化规律

3、德育目标

（1）树立生物体的结构与功能、局部与整体相统一的观点。（2）形成学生实事求是的科学态度和一丝不苟的科学精神。（3）养成学生批判性思考的能力。

2.教学重点/难点

教学重点

（1）通过探究细胞大小与物质运输关系的模拟实验理解细胞不能无限长大的原因。（2）细胞生长和增殖的周期性。（3）真核细胞有丝分裂的过程。教学难点

（1）细胞表面积与体积之比和细胞物质运输效率的关系。

（2）真核细胞有丝分裂过程中，各时期染色体行为和数目的变化，以及DNA数量的变化。3.教学用具 4.标签

教学过程 1.新课导入

（1）章节简述,利用小视频:《人的一生》比拟细胞的生命历程一般。（2）细胞增殖的新课导入 2.细胞不能无限长大

（1）模拟实验：细胞的大小与物质运输的关系。

讨论实验过程中出现的想象及结果，指导学生进行试验数据收集，通过模拟实验和讨论，学生充分理解了细胞体积越大，其相对表面积越小，细胞的物质运输的效率就越低，细胞表面积和体积的关系限制了细胞长大。

（2）联系细胞核是控制中心，补充说明细胞不能无限长大的另一个原因是细胞核的控制力限制了细胞的长大。（3）完成P114技能训练

3.细胞通过分裂进行增殖

①细胞增殖有什么重要意义？②真核细胞增殖的方式有哪些？③什么是细胞周期？细胞周期包括哪几个阶段？它们在时间分配上有什么特点？关于细胞周期的概念，教师要引导学生准确理解，只有“连续分裂的细胞”才具有细胞周期，例如皮肤的生发层细胞、根的分生区细胞等，细胞周期的起点是子细胞，终点也是子细胞。现有分裂间期，再有分裂期。4.植物细胞有丝分裂的过程

（1）回顾植物细胞的结构，播放植物细胞有丝分裂的过程动画。（2）总结各个时期的细胞特点: 在间期，细胞进行DNA的复制和有关蛋白质的合成。染色质丝状。染色质复制后出现姐妹染色单体。一个染色体上有2条染色单体，2个DNA分子。在前期，教师要引导学生分析出“细胞核中出现了什么、什么消失了”，并且要学生知道是从学生在教师的引导下观察有关动画、板图，思考并学会概述各个时期的主要特点。让学生通过观察图片、板图来观察细胞内所发生的现象，引起思考，加深理解。课件中的模拟动画可将微观、抽象的生命现象形象生动地呈现在学生眼前，有助于学生更好地理解各时期的特征，也可使学生理解有丝分裂的各个时期是为了研究方便人为划分。

细胞两极发出的纺锤丝形成纺锤体，染色体散乱分布在纺锤体中央。

在中期，教师要引导学生分析出在纺锤丝的牵引下，染色体的着丝点排列在赤道板上，染色体形态稳定，数目清晰，是观察染色体的最好时期。关于赤道板，要让学生明白是由于它与纺锤体的中轴相垂直而得名，实际上并不存在这个结构。

在后期，教师要引导学生分析出着丝点一分为二，姐妹染色单体分开，成为两条子染色体，在纺锤丝牵引下染色体向两极移动，形成两套数目和形态完全相同的染色体。

在末期，教师要引导学生分析出细胞核中什么消失了？什么重新出现了？植物细胞在赤道板位置上出现了细胞板，进而形成新的细胞壁，最后一个细胞分裂成两个子细胞。最后，教师再一次利用3D动画整体演示有丝分裂过程，使学生更好地理解各时期的特征。

利用简单的口诀帮助学生记忆分裂期各个时期的特点。

（3）比较动植物细胞有丝分裂的特点。利用表格的形式帮助学生总结。（4）有丝分裂过程细胞中染色体、染色单体及其DNA数目变化规律

以课本图6-3为例，总结细胞有丝分裂各个时期细胞中染色体数量、DNA数量和染色单体的数量变化，进而推广到不同生物，其中以2n表示染色体数量、2a表示DNA数量、2c表示染色单体数量，以表格的形式总结规律。

让学生根据表格中的数量变化，画出染色体、DNA数量变化曲线图。完成柱状图的试图题

5.有丝分裂的意义

回顾有丝分裂的整个过程，总结出有丝分裂的意义——“亲代的染色体经过复制以后，精确地平均分配到两个子细胞中，保持了亲代和子代之间遗传性状的稳定性。”

6.教学反馈

完成课本P115基础题、及《南方新课堂》课时训练。

6.教学反馈

完成课本P115基础题、及《南方新课堂》课时训练。

学生独立完成巩固知识

板书

一、细胞不能够无限长大的原因

1、细胞表面积与体积的关系限制了细胞的长大

2、细胞核所控制的范围

二、细胞通过分裂进行增殖

1、细胞增殖的意义

2、真核细胞分裂的方式

三、高等植物细胞的有丝分裂

1、细胞周期的概念

2、有丝分裂各时期的主要特点

3、动植物有丝分裂比较

5.细胞增殖的过程？ 篇五

细胞增殖是生物体的重要生命特点，细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物，以细胞分裂的方式诞生新的个体。多细胞生物，以细胞分裂的方式诞生新的细胞，用来补充体内衰老和死亡的细胞;同时，多细胞生物可以由一个受精卵，经过细胞的分裂和分化，最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出，通过细胞分裂，可以将复制的遗传物质，均匀地分配到两个子细胞中去。

意义：细胞以分裂的方式进行增殖，细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一，是生物体的重要生命特点。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁育以及遗传的基础。

6.细胞增殖教案 篇六

1 材料与方法

1.1 试验用多糖

白术粗多糖:选用来源于湖南平江的新鲜白术,干燥制成白术粉,再用TQ多功能提取浓缩机组(湖南省浏阳医药设备总厂生产)采用水提醇沉淀法提取白术粗多糖。

白术纯多糖:用常规方法将白术粗多糖去淀粉、去蛋白、除色素等杂质后,装入Sephadex G-100层析柱中,用pH7.2的磷酸缓冲液(PBS)洗脱,冷冻干燥后得到白术纯多糖。

复合粗多糖:以白术、黄柏、党参、苍术、陈皮、山楂、马齿苋为原料在80℃烘干后按照一定的比例混合,粉碎。提取方法同白术粗多糖。

1.2 主要试剂及仪器

上海伯奥生物科技有限公司四甲基偶氮唑蓝(MTT),GIBCO公司RPMI-1640培养基;Sigma公司Con A、SDS;上海恒信化学试剂有限公司淋巴细胞分层液;日本Bio-Rad 550型酶标仪。

1.3 试验动物分组及饲养管理

选择胎次、体重相近(5.30±0.25kg),健康状况良好的21d龄“杜长大”三元杂交断奶仔猪25头,随机分为5组,每组5头。试验采用单因素试验设计,分为5个处理:(1)对照组(CK);(2)0.3%白术纯多糖添加组(PPAM),(3)0.6%复合粗多糖添加组(CCP),(4)0.6%白术粗多糖添加组(CPAM),(5)抗生素组(15%金霉素150mg/kg+4%黄霉素50mg/kg)(ANT)。试验期为14d。根据断奶仔猪的营养需求和生理特点,并参照NRC(1998)[6]营养需要推荐及饲养标准配制日粮(见表1)。按断奶仔猪管理方案进行饲养,每次饲料添加量以吃饱后槽内略有余料为度,自由饮水。

注:每千克日粮中提供:维生素A11000IU;维生素D31100IU;维生素E 16IU;维生素K 1mg;泛酸6mg;核黄素2mg;叶酸0.8mg;尼克酸10mg;硫胺素0.6mg;生物素0.08mg;维生素B120.03mg。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 外周血淋巴细胞增殖性反应试验(MTT法)[7]

(1)血淋巴细胞的体外培养:无菌条件下颈静脉采血,体外肝素抗凝(20IU/mL)。采血2h内应用常规密度梯度离心法分离单个核细胞(MNC)。将抗凝血样用Hank,s液稀释一倍,小心加在淋巴细胞分离液上层,2000rpm离心10min,吸取中间云雾状白细胞层,用无血清RPMI1640营养液洗涤3次至悬液澄清为止。经台盼蓝染色,细胞存活率为95%以上,最后加入含10%新生牛血清的RPMI 1640培养液,活细胞计数并调整细胞浓度2.5×106/ml。(2)淋巴细胞增殖性反应测定:将稀释成2×106/mL密度的淋巴细胞悬液接种于96孔板上,每个样设12孔,每孔接种100μL。于37℃、体积分数为5%CO2及饱和湿度条件下培养69h,各孔轻轻吸去50μL上清液,再加入1mg/mL MTT溶液50μL,继续培养3h。每孔加入10%SDS-0.01mol/L HCl 100μL,置培养箱孵育2h,室温放置30min,用酶标仪测OD570值。试验组各孔的淋巴细胞增殖性反应大小以扣除空白组平均值的OD570值表示。

1.4.2 细胞因子测定

(按试剂盒操作说明进行)白细胞介素(IL-1、IL-2和IL-8)采用放射免疫法,用γ计数仪(中国科大中佳公司GC-300型)测定,试剂盒购于北京科美东雅生物技术有限公司。肿瘤坏死因子(TNF-α)采用ELISA法。

1.5 数据统计与处理

试验数据采用Excel 2003处理后,用SAS8.0中GLM程序进行方差分析,Duncan’s多重比较,结果用平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 各组早期断奶仔猪淋巴细胞增殖的比较

从表2可以看出,白术纯多糖组、复合粗多糖组和白术粗多糖组的淋巴细胞转化率比对照组分别高(P>0.05)出了32.61%,23.91%和28.26%;比抗生素组分别高(P>0.05)出35.56%,26.67%和31.11%。其中白术纯多糖组显著高于抗生素组(P<0.05)。

注:标注不同字母者表示差异显著(p<0.05)。

2.2 各组早期断奶仔猪血清中细胞因子的浓度

白术纯多糖、复合粗多糖和白术粗多糖组早期断奶仔猪血清IL-2浓度分别比对照组提高14.92%(P>0.05)、21.72%(P>0.05)和20.16%(P>0.05),与抗生素组比,分别提高20.60%(P>0.05)、27.75%(P<0.05)和26.10%(P<0.05)。白术纯多糖组、复合粗多糖组和白术粗多糖组早期断奶仔猪血清TNF浓度与对照组相比分别提高21.43%(P<0.05)、23.81%(P<0.01)和11.90%(P>0.05)。复合粗多糖组TNF浓度也显著高于抗生素组(P<0.05)。各组间早期断奶仔猪血清IL-1和IL-8浓度差异不显著(P>0.05)(表3)。

注:同行数据中肩注不同小写字母表示差异显著(P<0.05),肩注不同大写字母表示差异极显著(p<0.01)。

3 讨论与分析

3.1 多糖对早期断奶仔猪淋巴细胞增殖的影响

淋巴细胞转化率是评价细胞免疫功能的重要指标之一。据报道,黄芪多糖,当归多糖,芦荟多糖,蘑菇多糖等均能促进血液和脾脏T淋巴细胞增殖和转化[8,9,10,11,12]。本试验发现多糖均对Con A诱导的T淋巴细胞增殖有一定的促进作用,同时白术纯多糖显示出明显增高的趋势。抗生素组的效果最低,说明抗生素组不能促进淋巴细胞增殖。

3.2 多糖对早期断奶仔猪细胞因子浓度的影响

细胞因子是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的具有高活性、多功能的小分子物质、可以调节和决定免疫应答的性质,它们涉及免疫和炎症的每个环节。机体通过特异性和非特异性免疫防御外来微生物,而其机制大部分是通过细胞因子介导的。

IL-2具有广谱的免疫增强活性,可诱导T细胞和B细胞增殖分化,具有促进NK细胞功能与释放干扰素,抗肿瘤,抗病毒等作用。本试验结果表明,添加白术纯多糖、白术粗多糖、复合粗多糖均有提高IL-2的趋势(P>0.05)。这与任汉阳等[13]和马岩等[14]报道是一致的。任汉阳等报道大剂量的黄精粗多糖能显著升高阴虚模型小鼠血清中IL-2含量(P<0.01)。马岩等报道黄蘑多糖能提高免疫抑制小鼠的T淋巴细胞转化率(LTT)和IL-2的活性(P<0.05)。

肿瘤坏死因子(TNF)是介导和调节天然免疫的细胞因子,而且是特异性免疫应答与急性炎症反应之间的一种重要介质。饲喂血浆蛋白粉和特异性免疫卵黄日粮可以提高断奶仔猪血清中TNF含量[15];共轭亚油酸(CLA)能促进超早期断奶仔猪血清中TNF-α和IL-2的分泌[16];朱于敏等[17]实验发现灌喂储存期为3d酸奶的小鼠脾脏TNF水平分别较0d酸奶的对照组升高了8.04%、10.35%和9.70%。血清IL-2水平升高了23.11%(P<0.05)。本研究发现,白术粗多糖、白术纯多糖和复合粗多糖能提高血清中TNF-α的含量,其中以复合粗多糖效果较好。这与上述报道的效果是一致的。

4 结论

7.细胞的增殖第1课时教学设计 篇七

“细胞增殖”是人教版生物（必修1）第6章第1节的内容。本节内容包括细胞不能无限长大、细胞通过分裂方式进行增殖、有丝分裂、无丝分裂。本节内容与前几章所学的细胞器功能联系紧密，既是学习细胞分化、细胞的衰老和死亡的基础，也是学习减数分裂和遗传规律的基础，故本节内容在教材中起着承前启后的作用。本节内容从微观上解释了生物的生长现象，对学生理解生命的来之不易起到重要作用，对提高学生的生物科学素养也起到重要作用。

其中无丝分裂、细胞通过分裂方式进行增殖比较简单，学生自己经过阅读便能掌握。细胞不能无限长大这部分内容有一点难度，教师稍微指点一下学生，学生也能掌握。而有丝分裂的过程比较抽象且很复杂，是学生最难理解和掌握的，需要多花时间和精力在这个内容的教学上。而当年科学家在研究有丝分裂过程的时候，将细胞染色后在显微镜下观察细胞，绘出多个分裂过程的图像，接着将这些图像进行分类和排序，最后才了解细胞分裂的真实过程。故可以提供一系列有丝分裂过程图给学生，让学生自己亲手进行分类和排序，主动探究有丝分裂的过程，在分类和排序中潜移默化地学习染色体、细胞核等的变化，理解有丝分裂各个时期的特点，主动建构有丝分裂的过程。学生在进行排序后，对有丝分裂的过程有了一个大体的认识，此时再进行细胞周期的学习，便于学生的理解。教材中没有提供染色体的计数依据以及DNA和染色体等的数量关系，故在教学中应提供，便于学生建构有丝分裂染色体、DNA等的变化曲线。

二、学情分析

高一的学生分类能力、比较能力和归纳能力不强，需提供一定的素材给学生，锻炼学生的分类能力、比较能力和归纳能力。在学习各个时期特点的时候，其实就是将各个时期图像进行对比，总结、归纳出各个时期的区别和联系。学生在做练习的时候，往往不能准确地写出各个时期的全部特点，这跟学生的分类思维有关。此外，学生数学建模能力有待提高。数学建模一般是先收集数据，接着处理数据，然后利用数据作图。学生往往不懂得如何处理收集到的数据，这需要教师加以指导。

高一学生具有一定的发现能力和语言表达能力，也具有一定的主动探究能力，课堂上应创造机会给学生交流和表达。根据教材、学情和课标要求，确定如下教学目标和教学设计。

三、教学目标

（一）知识目标

简述细胞周期的概念，观察细胞的有丝分裂并概述其过程。

（二）能力目标

尝试将各时期图形进行排序，比较分析各时期特点，进行科学探究；制作各时期染色体、DNA等变化曲线。

（三）情感目标

体验有丝分裂过程的奇妙，养成质疑、求实、辩证的科学态度和科学精神。

四、教学重点

细胞生长和增殖的周期性，真核细胞有丝分裂的过程。

五、教学难点

真核细胞有丝分裂过程中，各个时期染色体行为和数目的变化、DNA数量的变化。

六、教学设计理念（依据）

以学生为主体，建构主义，核心知识高效教学理论，过程决定结果（哲学）。

七、教法（学法）

教师：多媒体直观教学法、指导法（小组合作探究法、讨论法、对比观察法）

八、教学设计过程

（一）课前准备

布置学生预习本节内容，教师打印有丝分裂过程示意图（见附件1）并剪下来用信封包好，上面写着：高等植物有丝分裂过程图，讨论：1、将下列的图形分类 2、按时间先后排序。待上课时候用。

（二）导入

（上课前将有丝分裂过程图分发给学生，2人一份）

投影：科学家的来信。同学们：你们好，我们是科学家，正在研究有丝分裂的过程，我们将细胞染色后在显微镜下观察并绘出多个分裂过程的图像。但是我们遇到一个难题：这些图像的先后顺序是什么？现将有丝分裂过程图寄给你们，诚邀你们一起探讨。请你们以科学家的身份，将手上的图进行分类，你想怎么分就怎么分，但是要有自己的分类依据，分好类之后再将这些图按时间先后进行排序。我们静候你们的回信，谢谢！

科学家

2015-1-19

短短的一封信，道出了科学家的谦虚和求实的科学态度。那我们不能让科学家们等得太久，现在就开始行动，同桌2人一组，将手上的图进行分类，分类好之后再进行排序，看谁分得又快又好。

（教学意图：吸引学生；培养学生求实和谦虚的科学精神）

（三）指导学生探究

投影：细胞部分结构

教师走到学生中间，倾听学生的讨论，了解他们是根据什么进行分类的。教师参与到学生的讨论中，并指导学生进行分类和排序。在指导过程中，教师注意观察哪些组的学生是根据有无核仁进行分类、哪些组的学生是根据有无纺锤丝进行分类、哪些组的学生根据有无染色体进行分类等等，便于请学生上讲台展示和学生的交流。

如果大多数学生不懂得怎么去分，教师应该加以指导，可以根据细胞核的有无、纺锤丝的有无、染色体的有无等进行分类。学生在分类过程中会遇到很多问题，教师要注意给学生解答和提供适当的帮助。

（教学意图：为分类图像和排序做好铺垫；给学生适当的指导，便于进行分类和理解各个结构的变化，进而建构有丝分裂的过程。

（四）展示探究成果

组织：请4个不同分类的组把自己的分类结果写在黑板上

分别提问：你是依据什么来进行划分的？对于有自己独特见解的学生要适当加表扬（比如，这位同学有自己独特的见解，老师非常佩服你），对于分得不好的学生要加以鼓励。其他同学还有什么疑问？你们赞同不赞同这组同学的分法，为什么？有哪些地方需要改进？（如果学生回答不出来，教师可以提示其他学生帮助回答，如果都没有学生回答得出来，最后教师才帮助解答学生的疑问）

教师作为主持人，主持学生的展示活动。学生在展示过程中会提及纺锤丝、染色质、染色体、姐妹染色单体、核膜核仁、细胞板、赤道板等。对于学生说得不清楚的概念、过程等，教师要加以纠正、补充和说明。学生一边展示，教师和全体学生一起分类、排序，最后经过全班同学的共同努力，慢慢形成正确的分类和排列顺序。

总结：在同学们的共同努力下，我们终于完成了分类和排序。可见科学探究路上不是一帆风顺的，在遇到问题的时候我们要冷静思考，要有自己独特的见解，大胆地质疑和推理。

（教学意图：培养学生语言表达能力，大胆质疑的精神。）

（五）各时期特点

接下来我们一起来看有丝分裂的模拟动画过程，比较一下我们的分类是否和动画过程相符合。

播放：有丝分裂模拟动画。

设疑：各个时期有什么特点呢？

讲解：间期主要特点为完成dna复制和有关蛋白质的合成。

指导：请观察、对比间期和前期两个图，间期哪些结构消失了？哪些结构出现了？由此可以总结间期的特点是什么？

指导：请用观察对比法，总结中期的特点、总结后期的特点、总结末期的特点。

小结：在学习各个时期特点的时候我们用观察对比法，找出它们的不同点。接下来我们再用观察对比法，学习动物细胞有丝分裂和高等植物有丝分裂有何不同。它们不同的地方是什么？

总结：通过学习，我们知道，有丝分裂的结果是产生两个子细胞，这两个子细胞和原来的那个细胞染色体数目、DNA数目是一样的，这有什么重要意义呢？

我们在学习各个时期图像特点的时候，用的是观察比较法，细心观察各个结构发生哪些变化，我们会得到很多信息。可见留心图形细处，处处皆学问。

（教学意图：培养学生运用方法解决问题的能力）

板书设计

有丝分裂[间期：合成DNA、蛋白质分裂期M前期染色质→染色体核膜核仁解体出现纺锤体中期：“排队”后期：“分家”末期：反前]

8.浙科版《细胞增殖》教学设计 篇八

1．教材分析

本节课选自浙科版高中生物必修一《分子与细胞》第四章第一节，它的内容主要涉及细胞周期和有丝分裂。本节课内容是学习减数分裂的重要基础。此外，细胞全能性、组织培养、克隆等的应用原理均与有丝分裂的特点和意义有关。因此，有丝分裂是高中生物的重要基础知识。

2．学情分析

从学生方面来看，授课的对象是高二年级学生。从知识起点上分析，他们在初中对“细胞的增殖”在细胞数量变化和周期变化上有初步的了解，但对细胞结构的变化（尤其是染色体行为和数目的变化、DNA数量的变化）尚未涉及。

高中阶段的学生虽然已经具备一定的抽象思维、辨证思维和创造思维的能力，但本节课内容存在微观、动态、抽象的特点，需要高度的空间想象能力和很强的推理能力，使得学生在学习中有不少难度，因此将利用资料、图片、动画等帮助学生理解。

3．教学重难点

教学重点：细胞增殖的周期性、细胞有丝分裂的过程。教学难点：细胞有丝分裂的过程。

4．教学目标 知识目标

1）观察有丝分裂并概述其过程；

2）简述有丝分裂过程中染色体数目、DNA数目的变化规律； 3）比较动、植物细胞有丝分裂过程的异同。2 能力目标

1）通过录像、图片的观察和比较，提高比较、分析、归纳的思维能力； 2）通过对加倍染色体来源的猜测和分析，提高科学推理的能力； 3）通过对有丝分裂真实过程的观察，学会鉴别、选择、运用和分享信息。3 情感态度与价值观

通过观察、讨论等活动，养成自主学习、主动思考的良好习惯；感悟科学实验中蕴含的理性精神与求真意识、批判精神与创新意识，逐步领悟科学的本质特征。

5．教学方法

为了突出重点、突破难点，我将主要采用讨论法、探究法等教学方法展开教学。结合多媒体展示组织学生积极主动参与探究过程，创造条件启发学生独立思考。

6．教学过程

（一）新课导入

教师引入：细胞像生物体那样也要经历生长、衰老、死亡。如果只有死亡，没有增殖是不可能的，那么细胞是如何增殖的呢？细胞增殖对于生物体有何意义呢？细胞的增殖，如何保证亲子代细胞在性质上的一致性呢？学生思考，教师总结，这就是我们今天要学习的内容

细胞增殖。

（二）讲授新课

教师展示细胞周期的示意图跟不同细胞的细胞周期持续时间表格，提问：

1、怎么理解细胞周期？

2、认为一个细胞周期起始点和止点分别在何处？

3、细胞分裂期和分裂间期所占的时间一样长吗？

4、不同生物的不同种类的细胞，细胞周期长短一样吗？学生观察图片，思考问题并相互讨论，回答问题，教师予以适当引导并总结，学生回答得出细胞周期的概念。

教师提问：细胞分裂间期为什么需要长的时间？引导学生推测出细胞分裂间期为细胞分裂作充分的物质准备。然后教师展示资料：近代科学研究证实，在细胞分裂间期，细胞内部发生着很复杂的变化，最大的变化特点是，完成DNA的复制和有关蛋白质的合成。复制的结果，每个染色体都形成两个完全一样的姐妹染色单体，呈长细丝状，由一个共同的着丝点连接。

然后播放植物细胞有丝分裂动态过程，先连续播放，再分段播放。在分段播放时，一边说明细胞内发生的变化，一边将体现各阶段典型特征的剪贴图展示在黑板上，让学生认真观察比较，说出划分不同分裂期的主要依据(实际就是找出各个时期的主要特点)。比较：

1、看染色体的形态数目变化。

2、看核仁、核膜的变化。

3、看纺锤体的变化。师生共同总结出细胞分裂各个时期的主要特点。

教师播放动物细胞有丝分裂过程的模拟动态过程，提问：动物细胞有丝分裂过程和植物细胞有丝分裂过程有哪些相同点和不同点。学生观看动画，思考问题并相互交流讨论，教师请个别学生回答。然后教师再展示动物细胞有丝分裂动态过程，动物细胞有丝分裂过程图。一边播放，一边描述分裂过程中的各种变化。最后，将动植物细胞有丝分裂过程图并列投影在屏幕上供学生观察、比较。教师展示动、植物有丝分裂的异同点的表格，让学生进行总结归纳，教师适当引导。

教师提问：在学习完了有丝分裂的相关内容之后，那么这个有丝分裂对于真核生物到底有什么意义呢？学生思考，并相互讨论分析，回答问题，教师总结。、（三）课堂总结

将通过板书对本节课的知识点进行复习、总结本节课的主要内容，并布置课后作业。学生在教师总结归纳的同时，检查自己是否掌握该知识，以便课后有针对的复习。

7、板书设计

第一节

细胞的增殖

一、细胞周期

1、概念

二、有丝分裂

1、植物细胞有丝分裂

2、动物细胞有丝分裂

3、动、植物细胞有丝分裂的异同点

9.高中生物细胞的增殖知识点 篇九

2：基因的分离定律的实质是：在减数分裂形成配子的过程中，等位基因随着同源染色体的分离而分离，分别进入两个配子中，随着配子遗传给后代;基因的自由组合定律：在减数分裂的过程中，在同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。这两个定律可以说是遗传学部分最重要的两个定律，经常在大题中出现，很多与遗传有关的题都是围绕这两个定律出的，同学们要记牢。

3：中心法则描述了遗传信息的流动方向，但是没有说明遗传信息可以从蛋白质传递到蛋白质，也没有说明遗传信息可以从蛋白质流向DNA或RNA。中心法则是很重要的一个法则，经常在考试中出现。

4：单倍体植株长弱小，高度不育，单倍体育种却可以明显缩短育种年限。这部分也是常考点，属于重难点知识，考生们要对此给予关注。

5：一个种群全部个体所含有的全部基因，叫做种群的基因库。大家对种群的基因库都会有一定的概念，但是完整地描述出来还是有一定的难度，所以同学们尽量记住种群的基因库的概念，避免丢分。

生物光合作用歌诀

光合作用两反应，光暗交替同进行，

光暗各分两步走，光为暗还供氢能，

色素吸光两用途，解水释氧暗供氢，

AD P变AT P，光变不稳化学能;

光完成行暗反应，后还原来先固定，

二氧化碳气孔入，C5结合C3生，

C3多步被还原，需酶需能还需氢，

还原产物有机物，能量贮存在其中，

10.细胞增殖教案 篇十

【关键词】 信号通路；细胞增殖；中西医；肾主生殖

【中图分类号】R339.2+1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）04-0073-02

Abstract：The ovarian granulosa cell proliferation is an important part of the human reproductive capacity. Based on the overview of GPER/EGFR/MAPK can promote protein involved in signaling pathways in granulosa cell proliferation ，we guess preliminarily it play a role its relationship with human reproduction and enrich the theory of "kidney main reproductive"， hoping to provide new research ideas and methods for the ovarian granulosa cell proliferation in the field of Chinese and western medicine treatment .

Keywords：signaling pathways； cell proliferation；traditional Chinese and western medicine ；kidney main reproductive

肾藏精，主生殖。精子、卵细胞及受精卵都应当列入生殖之精的范围，相关研究发现中医药在卵巢颗粒细胞的增殖中发挥重要作用，可能通过GPER/EGFR/MAPK信号转导通路发挥作用。

1 肾藏精，主生殖

生殖之精是肾精的重要组成部分，是形成子代胚胎的原始物质。《灵枢·经脉》曰“人始生，先成精，精成而脑髓生”，精子、卵细胞及受精卵都应当列入生殖之精的范围[1]。《女科正宗·广嗣总论》指出“男精壮女经调，有子之道也”，揭示受孕的机理在于男女肾气充盛，天癸成熟，精壮经调，适时和合，而成胎孕。

2 卵巢为奇恒之脏，卵巢藏泻体现“肾主生殖”

现代辅助生殖技术的发展与应用，使得“肾主生殖”理论的研究深入到了分子水平，为“肾主生殖”内涵的不断拓展提供了科学依据。卵巢属于胞脉范畴，形态实质与五脏相似，功能上能生成和排出卵子与六腑类同，可称为奇恒之脏[2]。解剖上通过卵巢固有韧带与子宫相连，藏泻有时，于卵泡期积肾之阴阳，以阴长为主促进卵泡的发育成熟，阴长之极，重阴转阳，于氤氲之时泻出元精，之后，重阴转阳，阴重阳旺，阴阳俱可，为孕育胞胎提供条件。卵巢颗粒细胞为卵泡发育成熟后随之泄出的人之元精，在一定程度上可以反映机体肾阳之盛衰。肾气虚，则冲任虚衰不能摄精成孕；肾阳虚，命门火衰，则生化失期，有碍子宫发育或不能触发氤氲乐育之气以致不能摄精成孕；肾阴虚而致热扰冲任血海，均不能摄精成孕，以致女性生殖功能下降。有研究已经证实补肾中药能够从基因、分子生物学、蛋白质等多个层次影响卵细胞质量，改善人类生殖能力。

3 “生殖之精”之卵巢颗粒细胞增殖机理探讨

基于GPER/EGFR/MAPK信号转到通路探讨“生殖之精”之卵巢颗粒细胞增殖机理。G蛋白偶联雌激素受体（GPER）是上世纪90年代从不同的细胞株中克隆获得的一种蛋白偶联受体家族中的新型雌激素受体[3]，广泛分布于多个系统的组织细胞中，包括神经系统、生殖系统、泌尿系统、免疫系统及循环系统等，卵巢、子宫、胎盘、前列腺、脑、心脏、肝脏、淋巴、乳腺等组织均发现了该受体的分布[4-6]，且发现其在多种癌细胞包括乳腺癌[3]、卵巢癌[7]、子宫内膜癌[8]、甲状腺癌[9]、睾丸生殖细胞癌[10]以及前列腺癌[11]中均有表达。其作用方式主要是通过与雌激素受体结合后活化并释放肝素结合性表皮生长因子激活EGFR，进而产生增殖效应以调控细胞增殖。表皮生长因子受体（EGFR）是受体酪氨酸蛋白激酶（RPTK）受体家族中的一员，为单次跨膜受体，其配体表皮生长因子（EGF）与生长、分化、免疫、肿瘤等有密切的关系。近年来有研究发现EGF能够调节卵巢颗粒细胞的增殖与分化。如文献报道[12]，EGF能够通过旁分泌的方式与其受体结合，从而调节卵巢颗粒细胞的增殖和性激素的分泌，从而影响卵泡的生长发育与生殖功能的调节。马会明等[13]通过动物实验证明一定剂量的EGF 对小鼠颗粒细胞增殖效应明显，EGF能够通过活化小鼠卵巢颗粒细胞的PI3K/AKT信号通路，促进颗粒细胞生长、增殖。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）是哺乳动物体内广泛存在的一种激酶，主要参与调控细胞的增殖、分化与凋亡。其作用途径主要有三条：第一，细胞外信号调节蛋白激酶（extracellularsignal regulated kinase，ERK）途径；第二，JNK途径；第三，p38MAPK途径。其中ERK途径是细胞增殖分化的重要途径。有报道指出，ERKl/2通路参与了FSH 对卵巢颗粒细胞甾类激素生成的调控过程[14]，是卵巢颗粒细胞增殖的重要信号通路，并主要通过细胞周期蛋白而发挥作用。

细胞周期是细胞生命活动的基本过程，细胞在周期时相的变迁中进入增殖、分化、衰老和死亡等生理状态。随着近年来研究的进展，细胞周期蛋白的种类越来越多，CyclinD是1991年由Motokura等[15]在研究甲状旁腺癌时首先分离，它的主要功能是调节细胞周期中G1/S期的过渡，其合成是在G1早期，并到G1后期达高峰，进入S期前降解，随后合成的是cycnilE。CyclinE是哺乳动物的另一种G1 期细胞周期蛋白，与相应的细胞周期蛋白依赖激酶结合，参与细胞进入S期。在卵巢颗粒细胞中，FSH通过cAMP-PKA信号转导通路激活细胞外调节蛋白激酶（ERK），促进细胞周期蛋白cyclinD2 表达，进而推动颗粒细胞增殖[16-17]。

4 GPER/EGFR/MAPK信号通路促进人类生殖能力的研究

张明敏等[18]通过研究补肾安胎方（菟丝子、桑寄生、川断、丹参、黄芪、当归）对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜EGFR表达的影响，证实补肾中药能够提高EGFR的表达。许静云等[19]通过研究补肾中药对EGF表达的影响，证实菟丝子提取物可以促进大鼠卵巢颗粒细胞EGF的表达，六味地黄丸、菟丝子黄酮可以促进雷公藤多苷对生殖损伤的恢复。李岚等[20]通过研究补肾化瘀方对PCO大鼠卵巢颗粒细胞表皮生长因子受体表达的影响，证实补肾化瘀中药能够改善PCO大鼠卵巢颗粒细胞EGFR的表达。

5 展望

近年来，由于生活方式的变化、妊娠年龄的推后以及一大批高龄失独家庭的出现，不孕不育患者人数逐年增加，如何改善人类生殖能力，提高人类生育水平成为辅助生殖领域亟待解决的问题。GPER/EGFR/MAPK信号通路可能参与促进颗粒细胞增殖并为“肾主生殖”理论的提供微观化解释。关于此信号转到通路介导细胞增殖的研究目前了解尚少，尚有待于临床与科研的进一步研究和考证。

参考文献

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11.添加肝素对猪睾丸细胞增殖的影响 篇十一

1 材料与方法

1.1 材料

ST细胞，由武汉中博生化有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养基。

对照组(常规细胞培养基)：90%DMEM+10%新生牛血清+1%双抗(100U/mL青霉素+100μg/mL链霉素);试验组：在常规细胞培养基的基础上添加肝素(终浓度为10U/mL)。

1.2.2 ST细胞增殖培养。

将ST细胞接种于96孔板中，接种浓度为2×105个/mL，每孔0.1mL，分为4组：不添加肝素组(A);添加肝素5U/mL组(B);添加肝素10U/mL组(C);添加肝素20U/mL组(D)。每组6个培养孔;培养条件为含新生牛血清10%的DMEM培养基、37℃、5%CO2培养箱培养。每天在倒置显微镜下观察细胞的形态变化情况。培养24h及48h后每组各取3个培养孔对细胞进行计数。

1.2.3 ST细胞转瓶培养。

分别将添加肝素(添加浓度为1.2.2中筛选的最佳浓度)培养与常规培养的ST细胞接种至转瓶中进行培养，48h后在倒置显微镜下使用长焦距物镜检查细胞，比较两者形态差异。

2 结果与分析

2.1 添加肝素对ST细胞形态的影响

添加肝素组整体上与不添加肝素组相比，培养36～48h后形态变化明显，细胞立体感增强，出现堆积，并有典型的岛状细胞集落出现，传代后细胞不再出现明显的岛状集落，但是细胞密度明显增加(图1)。

2.2 添加肝素对ST细胞增殖的影响

从表1可知，与不添加肝素组相比，添加肝素的3个组24h、48h细胞密度均有提高，特别是添加肝素10U/mL组48h后细胞增殖达到极显著水平(P<0.01)。

注：与不添加肝素组比较，添加肝素10U/mL组具有显著的促增殖作用。*表示P<0.05;**表示P<0.01。

2.3 添加肝素对ST细胞上转瓶培养的影响

细胞上转瓶培养24h后，添加肝素10U/mL组生长状态已经明显优于不添加肝素组，24h后差异更为显著，添加肝素10U/mL组细胞贴壁很紧，细胞密度更大(图2)。

3 讨论

关于肝素对细胞增殖的调节功能，Lippman等指出，肝素对细胞增殖的作用与其抗凝活性无关，小剂量肝素(中位有效剂量2～5μg/mL)抑制系膜细胞的血管平滑肌细胞增殖，促进内皮细胞和成纤维细胞增殖，大剂量肝素中位有效剂量(200～500μg/mL)也能抑制内皮细胞的增殖。研究中使用5～20U/mL(相当于20～100μg/mL)的肝素，发现对ST细胞具有促增殖作用。肝素对细胞增殖的不同影响可能与下列因素有关：(1)促进转化生长因子(TGF-β)从无活性的复合物中释放出来，后者促进成纤维细胞增殖，并抑制其他类型细胞增殖;(2)促进碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的内皮细胞增殖，抑制bFGF介导的动脉平滑肌细胞增殖;(3)阻抑血小板源性生长因子(PDGF)和内皮(ET-1)的释放。肝素对不同细胞的不同调节作用对于促进创伤修复、防止过度增殖和硬化可能具有重要意义。肝素对细胞增殖的影响与下列细胞内信号传导途径有关：抑制细胞内钙离子动员、阻断钠/氢离子交换;阻断磷脂酞肌醇代谢;抑制蛋白激酶C和丝裂原活化蛋白激酶;阻断细胞周期;抑制C-fos、C-myc、sgk基因表达。

ST细胞上转瓶培养效果不佳一直是疫苗生产企业生产高效价优质猪瘟疫苗的瓶颈。本研究通过在常规培养基中添加一定剂量的肝素，最终使得ST细胞能够上转瓶培养，且培养效果较好，其具体作用机制有待于进一步深入研究。

摘要：猪睾丸细胞(ST细胞)主要用于猪瘟等病毒的培养。猪睾丸细胞增殖试验结果表明,通过在常规培养基中添加肝素用来培养ST细胞,可有效增加细胞密度,改善细胞生长状态,有望为ST细胞工厂化转瓶生产提供指导依据。

关键词：猪睾丸细胞,肝素,形态,细胞增殖,转瓶

参考文献

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12.细胞增殖教案 篇十二

利凡诺对不同胚层来源细胞增殖能力的影响

目的:观察利凡诺对来源于不同胚层的细胞生长和增殖能力的影响.方法:运用形态学观察法观察细胞在经不同浓度利凡诺(3.13、6.25、12.5 μg・ml-1)作用不同时间(24、48、72 h)后形态学的改变,同时在荧光显微镜下观察细胞中利凡诺的.荧光强度.用噻唑蓝(MTT)法以及核仁组织区银染法(AgNOR)检测利凡诺作用后各细胞增殖能力的改变.结果:利凡诺作用24 h后,肝细胞(BRL-3A)及成纤维细胞(L929)的形态无明显变化,人脐静脉内皮细胞(HuVEC)突起变细甚至消失,细胞生长速度变慢;伴随药物浓度的增大,单位面积细胞数逐渐减少;3种细胞内利凡诺自发荧光随着药物浓度增大和时间延长而增强.MTT结果显示利凡诺对3种细胞的增殖都有一定的抑制作用,其中对HuVEC细胞增值能力的抑制强于另外两种细胞(均P<0.01).在不同浓度利凡诺作用下,HuVEC核仁组织区减少幅度较另外两种细胞更加明显,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:利凡诺对来源不同胚层的3种细胞的增殖能力均有抑制作用,其中对HuVEC的抑制尤其显著,提示该药对内皮细胞生长增殖的抑制较为特异.

作 者：罗昊 陈平圣 LUO Hao CHEN Ping-sheng  作者单位：东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009 刊 名：东南大学学报（医学版）  ISTIC英文刊名：JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2010 29(2) 分类号：Q253 关键词：利凡诺   人脐静脉内皮细胞   肝细胞   成纤维细胞  

13.细胞增殖教案 篇十三

环巴胺对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡及Shh、Gli-1基因表达的影响

目的:探讨环巴胺对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡及Shh、Gli-1基因表达的影响.方法:采用MTT法检测环巴胺对BGC-823细胞的生长抑制效应,倒置显微镜及AO/EB荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Shh、Gli-1 mRNA的表达情况.结果:环巴胺可明显抑制BGC-823细胞的`生长,呈时间剂量依赖性,并出现典型的细胞形态学改变;经32、64、96μmol ・L-1的环巴胺作用24h后的凋亡率依次为12.50%、31.50%、56.10%,明显高于空白对照组的2.10% (均P<0.01);Shh及Gli-1 mRNA均表达,环巴胺可下调Gli-1 mRNA表达,但对Shh mRNA表达无明显影响.结论:环巴胺可以抑制胃癌细胞BGC-823增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Gli-1基因表达有关.

作 者：任雪萍 姜藻 刘飞 顾晓怡 高峰 REN Xue-ping JIANG Zao LIU Fei GU Xiao-yi GAO Feng  作者单位：东南大学附属中大医院,肿瘤中心,江苏,南京,210009 刊 名：东南大学学报（医学版）  ISTIC英文刊名：JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2008 27(3) 分类号：Q253 Q255 Q786 R735.2 关键词：环巴胺   胃癌细胞   细胞凋亡   Shh   Gli-1   基因表达  

14.细胞增殖教案 篇十四

1 材料和方法

1.1 材料

白刺酮:由甘肃省医学科学研究院药物研究所从民勤沙漠野生白刺果中分离提取制得, 黄色结晶, 实验时, 以二甲基亚砜 (DMSO) 助溶加RPMI1640培养液配制成所需浓度 (二甲基亚砜含量为30μL/L) 。5-氟尿嘧啶 (5-FU) :上海旭东海普药业有限公司生产 (批号20080916) 。人胃癌细胞, 由兰州军区总医院药局实验室惠增。

1.2 方法

白刺酮对人胃癌细胞毒性作用:取培养细胞, 调整细胞浓度为l×108/L , 接种于24孔培养板, 1mL/孔, 加培养液1mL/孔培养24h后, 实验组分别加入白刺酮 (0.1, 0.5, 5mg/L) 和5-氟尿嘧啶 (10mg/L) , 200μL/孔, 对照组加等量磷酸盐缓冲液, 每组4个重复孔。在5%的CO2, 37℃, 饱和湿度条件中分别培养6h、12h、18h、24h和48h, 加 0. 4%的台盼蓝20μL/孔, 用血球计数板在光镜下计活细胞数, 取平均值, 以培养时间为横坐标, 活细胞数为纵坐标作图。

白刺酮对人胃癌细胞增殖的作用 以4×105/L 接种于16孔板 (1mL/孔) , 每孔再加2mL培养液, 培养箱中培养24h, 实验组分别加入白刺酮 (0.1, 0.5, 5mg/L) 和5-氟尿嘧啶 (10mg/L) , 300μL/孔, 对照组加等量磷酸盐缓冲液, 每组3个重复孔, 静置培养7d, 用姬姆萨氏液染色10min, 流水缓慢洗去染色液, 在×10倒置显微镜下计数含50个细胞以上的克隆, 计算克隆数。

1.3 统计学分析

实验数据 采用SPSS10.0软件完成统计处理。计量资料差异比较采用DUNNETT单因素方差分析。

2 结果

2.1 白刺酮对人胃癌细胞毒性作用

台盼蓝法测定结果显示, 分别给予人胃癌细胞白刺酮 (0.1, 0.5, 5 mg/L) 和5-氟尿嘧啶 (10mg/L) 培养6 h、12 h、18 h、24 h和48 h, 白刺酮组、5-氟尿嘧啶组活细胞数随白刺酮浓度的增加和给白刺酮后培养时间的延长而减少。给白刺酮后培养6 h时, 白刺酮 (0.1, 0.5, 5mg/L) 组和5-氟尿嘧啶组活细胞数比对照组分别减少了33.8%、35.8%、60.8% 和40.3%, 到18 h分别减少了57.3%、80.1%、99% 和59.6%, 差异有显著性 (P<0.01) 。白刺酮组间比较, 差异有显著性 (P<0.01) 。见图1。

与对照组比:aP<0.01;与5-FU组和0.1mg/L组比:bP<0.01

2.2 白刺酮对人胃癌细胞增殖的影响

计数结果发现, 胃癌细胞在含有白刺酮 (0.1, 0.5, 5mg/L) 和5-氟尿嘧啶 (10mg/L) 的培养液中培养7d, 克隆形成数比对照组减少了40.4%、47.6%、83.6%和43.4%, 差异有显著性 (p<0.01) , 见图2。

与对照组比:aP<0.01。

3 讨论

受不良生活方式 (吸烟、酗酒) 、环境污染、经常接触一些化学物质、膳食营养的不合理等多种因素影响, 恶性肿瘤等非传染性疾病成为人类死亡的主要原因。从甘肃省分布地区上看, 恶性肿瘤死亡率最高的地区在乌鞘岭以西河西走廊的武威、天祝、张掖、敦煌一带;从发病和死亡年龄特征看, 30岁以后随着年龄的增长, 恶性肿瘤的死亡率增加, 到60岁达到高峰[1]。由于化学药物在治疗中出现的毒副作用, 或某些肿瘤细胞对化疗药物不敏感而导致治疗效果不理想及治疗费用高等原因, 开发天然药物越来越受到人们的重视。甘肃有丰富的中草药自然资源, 动物实验表明[2], 白刺酮以50mg/kg、100mg/kg剂量腹腔注射给药10d, 对Hep荷瘤BALB/c小鼠肿瘤生长抑制率分别为29.41%、35.95%;对S180生长抑制率为27.94%、35.29%, 能提高小鼠碳粒廓清指数, 对免疫器官的重量有不同程度的增重作用, 同时也可使小鼠血清溶血素生成值增高。实验结果表明, 白刺酮对人胃癌细胞具有明显的毒性作用, 给予白刺酮 (0.1, 0.5, 5mg/L) 培养6h、18h, 活细胞数比对照组减少了33.8%～57.3%、35.8%～80.1%、60.8%～99% (P<0.01) 。白刺酮对细胞增殖具有明显的抑制作用, 给予白刺酮 (0.1, 0.5, 5mg/L) 培养7d, 克隆形成数比对照组减少了40.4%、47.6%、83.6% (p<0.01) 。

河西走廊的武威、天祝、张掖、敦煌一带正是白刺果分布生长最广泛的地区, 该地区日照时间长, 环境污染少, 可充分利用白刺果资源, 预防和抑制肿瘤的发生。

参考文献

[1]王永祥.兰州晨报[N].2003-01-04-A2.