去除眼袋有效的方法（精选4篇）
1.去除眼袋有效的方法 篇一
1、吸脂法去眼袋整形手术：患者眶隔脂肪增多并不明显，而真正脂肪增多者，多见于年轻人，其皮肤弹性好，眼轮匝肌力量好，只需去除脂肪，不必去除肌肉和皮肤。
2、单纯皮肤松弛者：去除多余皮肤，不必破坏其它组织，如眼轮匝肌和眶隔脂肪，这样可避免眶隔脂肪去除后出现凹陷及不必要的并发症，如眼球后出血而出现视力的丧失。
3、内切法去眼袋整形手术：对于下睑中重度膨隆的患者，从内路去除多余的眶隔脂肪，由于其皮肤具有良好的弹性，不会出现皮肤松弛，避免了皮肤外的切口瘢痕，创伤小，肿胀轻，甚至术后不肿胀，手术更加安全。
2.去除眼袋有效的方法 篇二
作者随机选取了4种园艺植物, 采用优化的CTAB法提取基因组DNA, 寻找一种经济、快速、简便的去除多糖等杂质并获得高质量DNA的、适于不同植物而又便于一般实验室操作的基因组DNA提取方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验材料
以牡丹 (Paeonia. suffruticosa Andrews.) 、扁豆 (Lablab purpureus (Linn.) Sweet) 、苦瓜 (Momordica charantial L.) 、葡萄 (Vitis vinifera L.) 叶片为材料, 用dH2O清洗除去表面污物, 用滤纸吸干表面残留水分, 标记分装, 置-20 ℃冰箱冷冻保存备用。
1.1.2 试剂
CTAB、PVP、β-巯基乙醇、Tris·HCl、EDTA、NaCl、氯仿/异戊醇 (24∶1) 、异丙醇、聚乙烯吡咯烷酮PVP、无水乙醇等均为分析纯, 购自上海生物工程有限公司 (Sangon公司) ;DNA Marker、λ-HindⅢ digest、Taq酶、dNTPs购自大连宝生物工程有限公司 (TaKaRa公司) 。琼脂糖购自北京华美公司。
1.1.3 仪器
Thermocycler PCR仪, 德国Biometra公司生产;Sigma 3K18冷冻离心机;Backman DU800分光光度计;DYY-Ⅲ型电泳仪, 北京六一仪器厂;BTS型凝胶成像仪, 英国UVP公司。
1.2 方法
1.2.1 改良CTAB法的操作步骤
参照Joseph Sambrook等[3]的方法并作适当改良, 进行基因组DNA的提取。
准备:将CTAB提取缓冲液 (100mmol/L Tris·HCl, pH 8.0) , 1.4mmol/L NaCl, 20mmol/L EDTA, 3% CTAB, 2% PVP, β-巯基乙醇使用时加入预热。
研磨:取叶片0.5～1g, 置于研钵, 加入液氮, 研磨成粉末;迅速转入1.5mL离心管中。
裂解:加入预热的CTAB提取缓冲液, 充分混匀, 65℃水浴60min, 期间不时小心摇动离心管。
抽提:冷却至室温后离心 (8 000r/min) 10min, 取上清液置于1.5mL 离心管中, 加入等体积氯仿:异戊醇 (24∶1) 抽提2次, 至有机相与水相交界处白色杂质消失。离心 (8 000r/min) 10min, 取上清液。
沉淀:将上清液转入另一离心管, 加入2/3倍体积的异丙醇, 小心混匀, 挑出DNA。
离析:加入适量1mol/L NaCl, 必要时可65℃助溶, 然后离心, 取上清。
沉淀:将上清液转入另一离心管, 加入2倍体积的无水乙醇, 轻轻旋转试管, -20℃沉淀过夜。
洗涤:离心, 沉淀用70%乙醇洗涤, 将DNA风干。
溶解:用TE溶解DNA, 然后加入5μl RNA酶 (5mg/mL) , 37℃水浴2h, 重复抽提和沉淀步骤一次。
将DNA样分装, -20℃保存, 用于近期研究。
1.2.2 DNA纯度检测
将提取DNA样液按一定倍数稀释后, 用紫外分光光度计测定OD260值、OD280值, 按照1个OD260值相当于50ng/μl和稀释倍数来换算DNA的浓度, 并计算DNA的产率, 用OD260/OD280的比值表示DNA样品的纯度, 最后将DNA样液稀释, DNA琼脂糖凝胶电泳, 溴化乙锭染色, 凝胶成像系统观察和拍照, 检测DNA的完整性。
1.2.3 限制性内切酶分析:
在20μl反应体积中, DNA样品5μg, 限制性内切酶HindⅢ 10U, 在37℃水浴过夜。
1.2.4 PCR扩增
SRAP扩增参照郭大龙和罗正荣[4]的方法, 所用引物为
Me2 5′-TGAGTCCAAACCGGAGC-3′;
Em3 5′-GACTGCGTACGAATTGAC-3′。
2 结果与分析
2.1 DNA紫外和电泳检测
样品DNA的A260/A280值均高于1.8, 说明该方法提取的DNA具有较高的纯度。各基因组DNA经电泳后图谱如图1所示。由电泳图谱可以看出, 改良CTAB法提取的不同种基因组DNA条带清晰, 亮度均一, DNA片段大小较一致, 无降解弥散, 说明提取的DNA纯度高、完整性好。使用上述改进的DNA分离技术, 可有效地除去细胞内的杂质, 防止多酚的氧化, 所得到的DNA无色透明, 而对照方法所得到的DNA为黄褐至深褐色。电泳分析表明, 无论从完整性和纯度上来看, 用改进后的方法提取的DNA完全符合分子生物学操作要求。
M:DL2000 marker;1, 2, 3, 4为牡丹、葡萄、扁豆、苦瓜。1, 2, 3, 4 represent for tree peony, grape, purple haricot, bitter melon.
2.2 DNA的酶切和SRAP-PCR检测
从酶切的结果来看 (图2) , 改进方法所得的DNA能被内切酶所彻底消化, 而常规方法所得的DNA均不能被内切酶酶切。SRAP-PCR扩增的结果同样说明以上改进方法所得的DNA作模板可以得到清晰整齐的条带 (图3) 。
3 讨论
有关植物基因组DNA提取针对不同试材特点及试验要求进行方法改良的报道很多[5], 且各有所侧重。Galice H等[6]采用了一种从干的褐藻组织中提取并纯化DNA的有效方法, 但是需要特殊的设备。利用CTAB法对不同种的基因组DNA进行提取, 提取上清液颜色各不相同, 上清液黏稠程度以及与氯仿和异戊醇混匀的难易程度也存在明显差别, 说明各材料中的多糖、酚类物质以及植物色素含量不同[2]。另外, 由于DNA在低浓度乙醇盐溶液中的沉淀速度远远高于多糖和色素等物质。李晓波等[7]在提取药材中的DNA时, 先用100mmol/L NaAc溶解DNA沉淀, 然后再用低浓度乙醇抽提, 分离出多糖。Cheng Y J等[8]先用水饱和乙醚和1.2～1.5mol/L NaCl溶液将大部分多糖去除, 再用2倍乙醇沉淀DNA可大大提高效率。陈大明法[9]基因组DNA是分两步提取的, 先用提取缓冲液除去多糖及酚类物质, 然后再用裂解缓冲液裂解细胞核, 使DNA释放出来。
M:DL2000 marker;1, 2, 3, 4为牡丹、葡萄、扁豆、苦瓜。1, 2, 3, 4 represent for tree peony, grape, purple haricot, bitter melon.
M:DL2000 marker;1, 2, 3, 4为牡丹、葡萄、扁豆、苦瓜。1, 2, 3, 4 represent for tree peony, grape, purple haricot, bitter melon.
Fang G等[10]在提取DNA的过程中在加入乙醇沉淀的同时加入1mol/L NaCl去除多糖等杂质, 取得了一定的效果。杜黎明等[11]在常规CTAB法基础上, 将抽提液的pH 8.0改为pH 5.5, DNA沉淀步骤中, 取上清液后, 加入5mol/L NaCl 600μl, 再加入400μL冷冻的异丙醇, 沉淀DNA。本研究借鉴前人结果做适当改进, 使用1mol/L NaCl溶液溶解常规方法提取的DNA, 离心后弃沉淀, 利用在1mol/L NaCl溶液中, DNA易溶解而多糖等杂质不易溶解的原理, 使多糖等杂质一步去除, 从紫外分光光度计结合凝胶电泳分析检测结果说明该方法能有效地去除植物叶片中的多糖、多酚类等物质, 并且该方法提取的植物基因组DNA的纯度和浓度均能满足进一步的分子生物学研究, 如PCR、酶切和Southern 分析等。
沉淀DNA首选的有机溶剂是乙醇。它对盐类沉淀少, 且痕量的乙醇易于挥发, 一般采用2倍体积的乙醇沉淀DNA。异丙醇的优点是所需的用量少, 速度快, 适宜于浓度低, 而体积大的DNA沉淀, 但容易使盐类、蔗糖等与DNA发生共沉淀, 且难以挥发除去。徐娜等[12]在应用快速提取法提取越橘基因组DNA时, 沉淀DNA时用冰冻的无水乙醇代替常规用的异丙醇, 取得了较好的效果。本研究两次沉淀DNA时先采用异丙醇沉淀再采用预冷的无水乙醇, 并用70%乙醇漂洗几次。这样在保证DNA的得率的同时也提高DNA了的纯度。在异丙醇沉淀时, 采取挑取絮状沉淀的方法, 也可减少蛋白质、多糖等其它杂质的影响, 从而提高了DNA纯度。
本方法提供了一个通用、简单易行, 成本低, 且安全的去除植物DNA提取过程中多糖等杂质的方法, 有广泛的应用前景。
参考文献
[1]黄晓丹, 张云贵, 应铁进.高质量植物基因组DNA的提取[J].植物生理学通讯, 2006, 4 (2) :311-314.
[2]马明, 杨克强, 郭起荣.改良CTAB法提取林木树种基因组DNA的研究[J].生物技术, 2007, 17 (3) :36-38.
[3]Sambrook J, Russell D W.Molecular Cloning:A Laboratory Manual[M].third ed.CSHL Press, Cold Spring Harbor, NewYork.2001.
[4]郭大龙, 罗正荣.部分柿属植物SRAP-PCR反应体系的优化[J].果树学报, 2006, 23 (1) :138-141.
[5]David E R, Jeffrey D V, Amy ME.High-throughput species identifica-tion:from DNAisolation to bioinformatics[J].Molecular Ecology Notes, 2007, 7, 199-207.
[6]Galice H, James AC, Wytze TS, et al.Afast andinexpensive DNAex-traction/purification protocol for brown macroalgae[J].Molecular Ecology Notes, 2007, 7:191-193.
[7]李晓波, 冯波, 张朝晖, 等.植物药材总DNA提取[J].中草药, 2002, 33 (7) :652-654.
[8]Cheng YJ, Guo W W, Yi HL, et al.An efficient protocol for genomic DNAextraction fromcitrus species[J].Plant Molecular Biology Reporter, 2003, 21 (2) :177a-177g.
[9]陈大明, 张上隆, 金勇丰.一种木本果树基因组DNA提取方法研究[J].浙江农业大学学报, 1997, 23 (6) :621-624.
[10]Fang G, Hammar S, Grumet R.Aquick and inexpensive method for re-moving polysaccharides fromplant genomic DNA[J].Biofeedback, 1992, 13 (1) :52-54.
[11]杜黎明, 毛伟海, 包崇来, 等.茄子基因组DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化[J].农业生物技术学报, 2007, 15 (4) :723-724.
3.用简单的方法去除眼袋 篇三
睡前在眼下部皮肤上贴无花果或黄瓜片，坚持下来可收到减轻下眼袋的美容效果。也可利用木瓜加薄荷浸在热水中制成茶，晾凉后经常涂敷在眼下皮肤上。
勺子按摩法
随身都会携带一把小汤勺，就是普通的铝制勺子，每天早晚用完眼霜之后，用勺子凸起的部分轻轻按压眼周，可以促进血液循环，舒缓眼周，会觉得有改善眼袋的效果。
茶水冷敷
把一小杯茶放入冰箱中冷冻约15分钟，然后用化妆棉浸在茶中，再把它敷在眼皮上，能减轻眼袋浮肿程度。
无名指轻压
睡前用无名指在眼肚中央位置轻压10次，每晚持之以恒，以舒缓眼部浮肿的问题。
眯眼运动
上眼睑与下眼睑有意识的进行闭合运动，每天做100次以上，坚持这个方法一段时间后，你会发觉眼袋慢慢消失了。
维e胶囊涂抹眼部皮肤
每晚睡前若能用维生素e胶囊中的粘稠液对眼下部皮肤进行为期4周的涂敷及按摩，能收到祛除眼袋、减轻衰老的良好效果。
眼霜按摩
使用比平时涂抹多一倍的眼霜量进行简单的眼部穴位按摩，舒缓眼部神经，加强眼部血液循环。
起床后按摩
做法：起床之后是去黑眼圈的最好时机。洗净面部后用双手做顺时针方向的打圈，按摩周围眼部的肌肤，5分钟左右即可。
功效：可以促进眼部周围的血液循环，消除眼袋。
睡前涂维生素E
做法：如果你眼袋本来就比较重，每晚睡前可以用维生素E胶囊中的粘稠液对眼下部皮肤进行为期4周的涂敷及按摩
功效：常常使用能达到消除下眼袋。
鸡蛋按摩法
做法：早上起来，发现眼皮浮肿，可以将一个鸡蛋煮熟后去壳，用小毛巾包裹住，合上双眼用鸡蛋按摩眼睛四周。
功效：可加快血液循环
茶叶敷眼
做法：喝完绿茶后茶叶可别扔，用纱布包好，放在冰箱里，早上起来把布包放在眼上敷一敷，对去眼袋也是有不小的效果。
功效：减轻眼袋浮肿。
用热毛巾热敷
做法：睡醒后最好立刻用和自己体温产不多的热毛巾敷眼，然后在用冷却的毛巾交换敷眼，10分钟左右即可。
功效：淡化黑眼圈。
马蹄敷眼法
做法：将马蹄和莲藕洗干净去皮之后，然后用干净的刀子将马蹄剁碎，放到榨汁机中，和两杯水调和之后隔渣，敷在眼部周围10分钟左右就可以。
功效：莲藕和分别含有丰富的铁质、蛋白质，有活血去瘀作用，去黑眼圈的效果非常好。
酸奶敷眼周
做法：早上如果你有喝酸奶的习惯，那么喝剩的酸奶就可以利用起来啦!将纱布放进酸奶里完全浸湿，然后敷在眼部周围10分钟左右，让眼部肌肤充分吸收水分和营养。
4.黑眼袋严重怎么去除 篇四
生活中，我们经常接触这样那样的光照，你会发现自己的眼部也是受光最为明显的一个部位，周围就会形成各种黑眼圈问题，因为长期的辐射让你的肌肤看起来比较黑，太多色素在其中沉淀，干燥，是导致黑眼圈的主要原因。
如果你有黑眼圈，开始的时候一定要注意，保持自己良好的作息时间，如果这个做不到的话，就去美容店，购买一张眼部面膜，为自己的眼部做保养，让自己的眼部在一个充分有营养的地方吸收各种元素，轻松去除黑眼圈，之后再来一个美容觉，这种解决方式要比你吃任何良药都管用。很多人为了解决自己的黑眼圈去药店买药，在这里要提醒大家，不要一味去购买药品，药也是多多少少含有毒素的，不妨试试物理去除黑眼圈方法。
你也可以选择一些化妆品，像是眼霜，还有补水性化妆品，让眼部有充分的水分可以吸收。但是一定要注意，不能购买杂牌，否则会起到适得其反的效果。眼霜能够让你有去除衰老的功效。让眼部看起来有活力。
看完上面的概述之后您就知道黑眼袋严重怎么去除了吧，如果您也觉得黑眼圈眼袋影响美观的话，在日常就需要好好的护理眼部肌肤，注意给肌肤补充水分，而且到了一定的年纪就应该使用眼霜，最重要的是不要熬夜，养成规律的作息习惯。
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