克隆技术

克隆技术（精选13篇）

1.克隆技术 篇一

克隆生物技术论文

猪USF1基因克隆与序列分析

摘要：研究克隆了猪USF1基因1 382 bp的cDNA序列(登录号：EF 219407)和5 516 bp的DNA序列(登录号：EF 625885)。序列分析发现猪USF1基因编码区序列与人、小鼠的同源性分别为99%和98%。基因组序列分析发现猪USF1基因包含11个外显子和10个内含子，内含子的剪接方式均符合“GT-AG”法则。

关键词：猪;USF1基因;克隆;序列分析

中图分类号：S828;Q78 文献标识码：A 文章编号：0439-811424-6175-03

上游刺激因子1(Upstream stimulatory factor 1，USF1)是螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链(HLH- LZIP)转录因子家族成员之一[1]，可以与USF2形成二聚体，并能识别DNA的E-box序列，调节基因转录[2]。人类USF1基因位于1q22-q23[3]，并广泛表达于机体的各个组织，调控糖和脂肪代谢基因的表达[4]，此外USF1基因还具有调节免疫反应和细胞周期的功能[5]。研究发现USF1基因可以作为调节治疗人的胰岛素抵抗葡萄糖不耐症、II型糖尿病和向心型肥胖易感症的候选基因[6-9]。本研究利用EST信息和测序的方法克隆了猪USF1基因并进行了序列分析，为进一步研究该基因对猪生长发育的调控机理具有重要的意义。

1 材料与方法

1.1 试验材料

采集4月龄大白猪(湖北省农业科学院畜牧兽医研究所原种猪场)的肌肉组织，用液氮速冻置于

-70 ℃中，利用TRizol法提取总RNA，反转录得到cDNA。利用DNA提取试剂盒[天根生化科技(北京)有限公司]提取DNA，贮存于-20 ℃。

pMD-18T vector system、DH5α购自宝生物工程(大连)有限公司;Gel Extraction Kit购自生工生物工程(上海)股份有限公司。

1.2 引物设计

以人的基因序列为探针，利用NCBI中的BLAST工具在GenBank数据库中搜索同源序列，筛选猪的同源性EST(标准：长度≥200 bp，相似性≥80%)，用DNAStar软件包中的SeqMan程序进行EST序列拼接，参照拼接的contig(重叠群)采用Primer5.0软件设计引物U1F/U1R，U2F/U2R，U3F/U3R等3对引物扩增USF1基因的cDNA序列。参照USF1基因的cDNA序列设计U4F/U4R，U5F/U5R，U6F/U6R，U7F/U7R，U8F/U8R，U9F/U9R等6对引物(表1)扩增USF1基因的序列。引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

1.3 PCR扩增与测序

PCR扩增体系为25 μL，包括50 ng 模板DNA、2.5 mmol/L 1×Taq Buffer、1.5 mmol/L MgCl2、2.5 mmol/L dNTPs、0.5 mmol/L PCR primers、2 U Taq DNA聚合酶。PCR反应程序为：94 ℃预变性4 min; 94 ℃变性45 s，退火(温度、时间根据引物来确定)，72 ℃延伸90 s，35个循环;最后72 ℃延伸10 min。PCR产物以1.5%琼脂糖凝胶电泳检测，用Gel Extraction Kit试剂盒纯化回收，与pMD-18T vector system连接，并转化大肠杆菌DH5α，将阳性克隆送至北京奥科生物技术有限公司测序。

2 结果与分析

2.1 RT-PCR扩增USF1基因

以大白猪cDNA为模版，利用引物U1F/U1R，U2F/U2R，U3F/U3R均扩增出了特异带，RT-PCR扩增产物结果如图1所示。将PCR产物回收、纯化、克隆测序，测序结果显示引物U1F/U1R扩增产物长度为613 bp(图1a)，引物U2F/U2R扩增产物长度为312 bp(图1b)，引物U3F/U3R扩增产物长度为520 bp(图1c)。

2.2 猪USF1基因的cDNA序列同源性分析

利用DNAStar软件的SeqMan程序将RT-PCR扩增得到的片段进行拼接，得到一条长1 382 bp的 cDNA序列。将获得的猪USF1基因的cDNA序列分别与人USF1基因cDNA序列(NM_007122)和小鼠序列(NM_009480)进行比对。结果表明，猪与人、小鼠的同源性分别为99%和98%，确定所获取的序列为猪的USF1基因，提交到GenBank，得到登录号为EF 219407。

2.3 猪USF1与部分物种USF1的进化关系

利用GenBank已有的USF1蛋白质序列： NP_001001161(USF1，Cattle)，NP_001007486(USF1， Gallus)，NP_009053(USF1，Human)，NP_033506 (USF1， Mouse)， NP_113965(USF1，Rat)以及猪USF1基因编码的氨基酸序列， 利用ClustalW软件对6个物种的USF1氨基酸序列进行了序列比对，结果发现猪与人和牛的同源性达到了99%，与小鼠和大鼠的同源性达到了98%，并构建了系统进化树(图2)。

2.4 猪USF1基因组序列的克隆和序列分析

根据人的cDNA序列和人的基因组序列比对结果，预测的猪USF1基因内含子，参照分离得到的基因序列，设计U4F/U4R，U5F/U5R，U6F/U6R，U7F/U7R，U8F/U8R和U9F/U9R等6对引物，以大白猪基因组DNA为模板，PCR扩增猪USF1基因的10个内含子序列，扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳，检测结果如图3。

引物U4F/U4R在猪基因组中的扩增片段长度是2 094 bp，其中第1内含子的长度为2 007 bp;引物U5F/U5R在猪基因组中的扩增片段长度740 bp，其中第2，3内含子的长度分别为363 bp和157 bp;引物U6F/U6R在猪基因组中的.扩增片段长度783 bp，其中第4，5内含子的长度分别为301 bp和241 bp;引物U7F/U7R在猪基因组中的扩增片段长度600 bp，其中第6，7内含子的长度分别为249 bp和135 bp;引物U8F/U8R在猪基因组中的扩增片段长度656 bp，其中第8，9内含子的长度分别为153 bp和249 bp;引物U9F/U9R在猪基因组中的扩增片段长度690 bp，其中第10内含子的长度为192 bp。利用DNAStar软件的SeqMan程序将扩增得到的片段进行拼接，得到一条5 516 bp的DNA序列，将序列拼接提交到GenBank收录号为EF 625885。基因组序列分析发现猪USF1基因包含11个外显子和10个内含子，内含子的剪接方式都符合“GT-AG”法则。 3 小结与讨论

本研究中猪USF1基因的cDNA序列与人和小鼠的同源性分别为99%和98%;编码区的高度保守性证实了所分离基因的正确性，同时也为利用小鼠等模式动物的基因信息来进行畜禽基因组学的研究提供依据。

脊椎动物间的基因序列具有高度的保守性，根据已知物种的基因组序列，可以预测其他物种同源基因的基因序列。本研究利用人USF1基因序列，预测了猪USF1基因序列，并通过试验获得了相应的基因组序列。测序结果表明，所获得的候选基因的内含子和外显子组成及相对位置与预测结果一致，且内含子的剪接方式均符合“GT-AG”法则。

参考文献：

[1] GREGOR P D， SAWADOGO M， ROEDER R G， et al. The adenovirus major late transcription factor USF is a member of the helix-loop-helix group of regulatory proteins and binds to DNA as a dimer[J]. Genes Dev，1990，4(10)：1730-1740.

[2] SIRITO M， WALKER S， LIN Q， et al. Members of the USF family of helix-loop-helix proteins bind DNA as homo- as well as heterodimers[J]. Gene Expression，1992，2(3)：231-240.

[3] SHIEH B H， SPARKES R S， GAYNOR R B， et al.Localization of the gene-encoding upstream stimulatory factor (USF) to human chromosome 1q22-q23[J]. Genomics，1993，16(1)：266-268.

[4] LEE J C， LUSIS A J， PAJUKANTA P. Familial combined hyperlipidemia： Upstream transcription factor 1 and beyond[J]. Current Opinion in Lipidology，，17(2)：101-109.

[5] TERRAGNI J， NAYAK G， BANERJEE S， et al.The E-Box binding factors Max/Mnt， MITF and USF1 Act coordinately with FoxO to regulate expression of Pro-apoptotic and cell cycle control genes by phosphatidylinositol 3-kinase/Akt/GSK3 signaling[J]. Journal of Biological Chemistry，，286(42)：36215-36227.

[6] PAJUKANTA P， LILJA H E， SINSHEIMER J S， et al.Familial combined hyperlipidemia is associated with upstream transcription factor 1(USF1)[J].Nature Gene，，36(4)：371-376.

[7] KOMULAINEN K， ALANNE M， AURO K， et al.Risk alleles of USF1 gene predict cardiovascular disease of women in two prospective studies[J]. Plos Genetics，，2(5)：672-681.

[8] COON H， XIN Y， HOPKINS P N， et al.Upstream stimulatory factor 1 associated with familial combined hyperlipidemia， LDL cholesterol， and triglycerides[J]. Humman Genet，，117(5)：444-451.

[9] SANCHEZ A P， ZHAO J H， YOU Y， et al. Role of the USF1 transcription factor in diabetic kidney disease[J]. American Journal of Physiology-Renal Physiology，2011，301(2)：271-279.

2.克隆技术 篇二

近日, 由北京市畜牧兽医总站等单位承担的种公猪克隆项目取得重要进展, 本市克隆种公猪产下第一窝后代, 共产仔11头, 窝重为11.2千克, 个体平均体重1.02千克, 目前仔猪健康状况良好。

据市畜牧兽医总站专家介绍, 全国对优秀种公猪的需求很大, 而优秀种公猪的数量稀少。克隆种公猪后代的降生, 标志着克隆技术在国内现代化养猪中的大规模应用进入实质生产阶段, 利用克隆技术将快速、准确、健康地扩大优秀种公猪的数量, 提高养猪业整体的发展水平, 在养猪生产及育种改良过程中将引起一次新的革命。

3.砂糖橘克隆育苗技术 篇三

近年来，随着砂糖橘市场持续向好，苗木市场需求旺盛，甚至出现供不应求的现象。为此，种植户往往需提前一年订购苗木，价格也水涨船高，每株小苗卖到了七八元。

在设施大棚中，采用植物克隆技术可以实现砂糖橘的周年快繁与多代循环繁殖，这是嫁接和扦插繁殖技术不可比拟的，是当前砂糖橘产业化发展必不可少的一项种苗培育新技术。现把砂糖橘克隆技术要点介绍如下：

1.从优良母树上选择半木质化、腋芽饱满、叶片完整、无病虫害的枝条，截成带有一芽一叶、长约4厘米的小短枝。取材宜在清晨进行。

2.将剪截好的小短枝每50根一捆好，用500毫升/升HF-10生根复合药剂处理1小时，以促进切口愈合及快速生根。

3.处理好的小短枝要直立种植，芽和叶须露出基质面， 叶面朝上，株行距为5厘米×10厘米，以叶片互不重叠为准。

4.水分是克隆育苗最为重要的影响因素，特别是在盛夏的中午，短时间内缺水就会使基质上的小短枝枯萎，导致育苗失败。因此，接种操作完毕后， 立即开启农业智能电脑系统，进行水分温度全程自动化、精确化管理。

5.通常第一代苗，10～15天形成愈伤组织和根源基，30～40天形成发达根系，可移栽至大田或者直接出售。如果采用以苗繁苗技术，会激发生根基因，生根时间可以缩短至20～25天，生产繁殖效率更高，速度更快。

6.移栽应选择在傍晚或者阴天进行，栽后浇足定根水，如果移栽得当，几乎无缓苗期。移栽成活率很高，在高温季节也可以达到95%以上。15天后可以按薄肥勤施的原则进行肥水管理。

采用植物克隆技术，可以以砂糖橘的脱毒苗为母本，进行多代循环繁殖，大量生产脱毒种苗。在温室条件下及农业智能系统的精确控制下，可以进行周年快繁、周年移栽、周年建园和周年出售，一年可扩繁12代左右，年生产种苗几十万至数百万株，每株生产成本极低。从而实现了砂糖橘的工厂化育苗和产业化生产。

地址：山东省威海市荣成农业高科技示范区（城西街道） 邮编：264327

电话：0631-7852751

4.辩论：克隆技术的利与弊 篇四

克隆技术在当今社会已经展示出来广阔的应用前景，例如培育优良畜种和生产实验动物，生产转基因动物，生产人胚胎干细胞，以用于细胞和组织代替的疗法，更能复制濒危的动物物种，保存和传播动物物种资源。我想，对于这些对方辩友已经无需否认了。

然而，对于对方辩友所担心的克隆技术对自然进化的干扰，对社会伦理道德的破坏，对…………………………………….等等弊端，有些或许的确存在，但那都是可以通过技术、法律等手段来进行限制和解决的。难道能仅仅因为转基因存在的风险性就眼睁睁的看着全球粮食危机的日益严重。难道说惧怕于对后代遗传性质的人工控制，就扼杀掉患有中风、癌症、艾滋病、心脏病等等病人痊愈的希望么。伦理也好，道德也罢，都是随着人类的发展，社会的变迁不断改变的。而对于克隆这一新兴的科学技术而言，它正在为人类的生活生存带来更富足的环境，更长久的可能性。现在的克隆技术还处于研发阶段，的确存在着一些弊端。然而我们有理由相信在不久的将来，克隆技术将渗透到我们生活的各个领域，给我们的生活带来翻天覆地的变化。请不要把这当做是一件很科幻的事情。就像秦始皇一定觉得社会主义很科幻。我们永远无法站在过去平评断未来。

最后，我们都知道，任何事物都有其两面性。科学技术更是一把双刃剑。过犹不及的道理大家都懂，克隆技术现阶段的不成熟和对伦理道德的冲击也使人们限制了克隆技术在某些领域的应用。然而，在医学角度和保护生物多样性的角度上克隆技术也许真的能在生物科学技术上取得突破。与此同时，克隆技术客观存在的巨大理论意义和实用价值也使得对于它的研究与开发进入了一个高潮。我相信人们能在人道主义和克隆技术之间找到一个适当的尺度，从而达到它最终服务于人类、，造福于人类的目的。

1)克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦。2)克隆实验的实施促进了遗传学的发展，为“制造”能移植于人体的动物器官开辟了前景。

3)克隆技术也可用于检测胎儿的遗传缺陷。将受精卵克隆用于检测各种遗传疾病，克隆的胚胎与子宫中发育的胎儿遗传特征完全相同。

4)克隆技术可用于治疗神经系统的损伤。成年人的神经组织没有再生能力，但干细胞可以修复神经系统损伤。

5)在体外受精手术中，医生常常需要将多个受精卵植入子宫，以从中筛选一个进入妊娠阶段。但许多女性只能提供一个卵子用于受精。通过克隆可以很好地解决这一问题。这个卵细胞可以克隆成为多个用于受精，从而大大提高妊娠成功率。

一.利用克隆等生物技术，改变农作物的基因型，产生大量抗病、抗虫、抗盐碱等的新品种，从而大大提高农作物的产量。

二.培育大量品种优良的家畜，如培养一些肉质好的牛、羊和猪等，也可以培养一些产奶量高，且富含人体所需营养元素的奶牛。

三.对医疗保健工作产生重大影响，如依靠分子克隆技术，搞清致病基因，提出疾病产生的分子生物学机制；为器官移植寻求更广泛的来源，将人的器官组织和免疫系统的基因导入动物体内，长出所需要的人体器官，可降低免疫排斥反应，提高移植成功率。

四.保护环境和濒危动植物，以克隆技术再现物种。五是为医学研究提供更合适的动物，大大提高试验的精确度和安全性

弊:1)克隆将减少遗传变异，通过克隆产生的个体具有同样的遗传基因，同样的疾病敏感性，一种疾病就可以毁灭整个由克隆产生的群体。可以设想，如果一个国家的牛群都是同一个克隆产物，一种并不严重的病毒就可能毁灭全国的畜牧业。

2)克隆技术的使用将使人们倾向于大量繁殖现有种群中最有利用价值的个体，而不是按自然规律促进整个种群的优胜劣汰。从这个意义上说，克隆技术干扰了自然进化过程.4)转基因动物提高了疾病传染的风险。例如，如果一头生产药物牛奶的牛感染了病毒，这种病毒就可能通过牛奶感染病人

5)克隆技术应用于人体将导致对后代遗传性状的人工控制。克隆技术引起争论的核心就是能否允许对发育初期的人类胚胎进行遗传操作。这是很多伦理学家所不能接受的。

5.克隆技术 篇五

邱仁宗

【教学目标】

1．朗读课文，明确作者观点,了解克隆技术中的伦理道德问题。2．理解本课的论证方法，学习论证观点的方法。

3.学习作者严谨的科学态度，培养自己对现代科学的正确认识和理解。【教学重难点】

1．理解本文层层深入的严密论证，体会正反论证的作用。2．品味本文语言表达的科学性、准确性。【课时安排】二课时 【教学过程】

第一课时

一．导入：

《西游记》中的孙悟空有个神通，就是拔掉身上的毫毛就可以变出无数个孙悟空的离奇故事想必大家都一定还记得，故事表达了人类对复制自身的幻想。现在随着科学技术，特别是克隆技术的发展，克隆人类已经不是梦想。但是，科学技术是一把双刃剑，在其造福人类的同时也会带来一些负面效应。这就向我们提出了一个问题：现代生命科技，要不要尊重伦理学原则，要不要倾听伦理的声音？让我们一起走进邱仁宗先生的《克隆技术的伦理问题》一文中寻找答案。

二．作者简介 ：

邱仁宗，毕业于清华大学文学院，华中科技大学生命伦理学研究中心主任，北京大学医学部兼职教授，国家人类基因组北方研究中心伦理委员会主任委员，世界技术网络2002伦理学奖获奖人，国际单体型图委员会委员，国际妇产科联合会生殖健康和妇女健康伦理委员会委员。邱仁宗教授是我国著名的生命伦理学家，他对人类胚胎干细胞中的伦理争议深有研究。在20世纪80年代初，把生命伦理学系统地介绍到中国。

三.文体知识

议论文有两种基本议论方式，即立论和驳论。立论指议论目的是为了从正面证明自己提出来的论点。驳论指议论目的是为了反驳某一错误的论点或相关的论据、论证。在同一个论证过程中，立论和驳论乃是一物的两个方面，两者之间存在着互相依存的关系。四．字词积累

偏好（hào）不可估量（liáng）当做（dàng）克隆（lóng）

畸形（jī）哺乳（bǔ）伦理（lún）纳粹（cuì）鉴别（jiàn）

脊椎（jǐ）

排斥（chì）

细胞（bāo）五．整体感知

1.从课文题目来看，你得到哪些信息？你认为本文论述的重点是什么？ 明确：从课文题目来看，本文谈论的是关于（1）克隆技术（2）伦理问题。论述的重点其实就是关于克隆人的伦理问题。这是本文的论题，不是观点。

2.结合课文内容谈谈，什么是克隆人？能不能克隆出和供体完全相同的人？ 明确：首先要了解什么是“人”：不仅仅是生物学上的生命体，还是一个具有独特心理、社会性的人。“克隆人”：具有与他或她的父本或母本相同的基因组；还具有其特殊的心理、行为、社会特征。

在现有技术下无法克隆出和供体完全相同的人，关键在于父本或母本的生长环境无法复制。

3.本文作者的观点是什么？

明确：在技术上可能做的克隆人，在伦理上不应该做。（不要克隆人。）4.“伦理”是什么意思？

明确：指人与人相处的各种道德准则。六．争做最佳辩手

朗读课文“有什么理由可在伦理上为克隆人辩护”部分，为自己的论点从课文中寻找依据。同桌间分配正方、反方，学生随手圈点标画，找到自己观点的依据，为辩论做准备。

正方观点：不要“克隆”人。

反方观点：在某些情况下，需要“克隆”人。

反方观点的依据：（1）是不育者的唯一偏好的选择；（2）可以避免遗传病；（3）为了科学研究；（4）为病人提供器官，将来用作移植；（5）为了“优生”；（6）克隆同性恋者，发展同性社区；（7）进行星际航行。

正方观点的依据：（1）成功率低；会在克隆过程中产生严重缺陷的克隆人；需要大量经费，不是所有人都能承受。（2）成功率低；会在克隆过程中产生严重缺陷的克隆人；需要大量经费，不是所有人都能承受，会产生严重后果。（3）克隆人也是人，长大后不愿意当做被研究者怎么办？（4）克隆人也是人，长大后不愿意提供器官，怎么办？（5）克隆什么样的人才算“优生”不好界定；克隆的人会使意识形态的、宗教的、民族的争斗加剧，世界会更加得不到安宁。（6）用同性恋者的体细胞克隆出来的不一定是个同性恋者。（7）克隆人不愿意作星际航行，要回到地球去，怎么办？

小结：本部分内容分别从反面和正面加以论证，客观上让读者了解所谓的克隆人的理由都是不能成立的，因为从伦理上讲，“克隆人也是人”克隆人应享有“人”的权利。

第二课时

一．合作探究

1.作者在提出反对克隆人的论证之前，为什么要列举不成立或不是根本性反对克隆人的理由，并进行反驳呢？本部分内容是多余的吗？

明确：作者首先对赞同克隆人的各种理由进行逐一批驳，再列举五条不成立或不是根本性反对克隆人的理由，并指出这些理由不科学，不严密，不成立，就把推理中的各种漏洞堵上了，自然得出对克隆人的根本性的反论证，这使文章的推理显得更全面，更严密。这样不多余。

2.“滑坡论证。即使克隆人的一些理由本身可以成立（例如解决不育、防止显性遗传病），一旦迈出克隆人的第一步，后面就很难阻挡。因此，必须在开始就刹车。”这段话主要运用的论证方法是什么？“滑坡”、“刹车”的含义是什么？

（常用论证方法有举例论证、道理论证、引用论证（如引用故事则属于举例论证，如引用名言则属于道理论证）、对比论证、比喻论证、类比论证（常有“同样”“诸如此类”等词语）

比喻论证；一旦迈出克隆人的第一步，后面就很难阻挡；停止克隆人。二．品味语言

1．探究课文第二部分，体会论证的严密性。

正面论述：①七个反面观点逐条反驳。②细致分析反面观念，加以反驳（不仅从理论上分析，而且引用数据）。③反驳的核心是——克隆人也是人。

反面论述：①克隆人一旦被复制出来，就有人权，就不能被当作工具。②用辩证法反驳优生学。

2．品味语言，讨论文章第三部分论证的严密性。

明确本部分论证：先列举一系列反对克隆人的理由，在经过了一番反驳以后，在雄辩的基础上，作者把自己的观点系统总结了出来：第一，克隆人一旦复制出来，就也是人了，而不是人的科学实验工具和手段。第二，克隆人的过程中，产生的怪异、畸形儿，负面后果是严重的。第三，在犯罪学上，其真假难辨。第四，由此而引起的其它可能性后果难以设想。三．课堂小结 本文使用的论证方法：

 举例论证、道理论证、正反对比论证。 正反对比论证：

 反面论证：“辩护”全节及“反论证”节的前半部分均为反面论证。 正面论证：“对克隆人的根本性的反论证”四点为正面论证。

【课堂寄语】

科技是一把双刃剑在运用新科技、新发明的过程中，我们应趋利避害，防患于未然，以更好地造福人类，这也是科学精神的一部分。四．拓展延伸

资料：爱因斯坦的烦恼

1905年爱因斯坦提出了狭义相对论，推动了核能的使用。核技术一方面可以为人类造福建造核电站，另一方面却是制造出“大规模杀伤性武器”——核弹，给和平带来了极大的威胁。

核技术和核机密的扩散成为了冲突的引燃点之一。朝鲜核问题、伊朗核问题以及印巴核竞赛和恐怖主义一样，给社会增添了不和谐的因素。

爱因斯坦曾说如果他知道他的理论会发展成原子弹，他情愿当初去当修锁匠。五．布置作业

1.下列加点字的注音全都正确的一项是()

A.克隆(lún)干涸(gù)窥见(kuī)满腹经纶(lún)

B.惬意(qiè)伦理(lóng)褴褛(lǒu)沽名钓誉(gū)

C.迄今(qì)坎坷(kǎn)歼灭(qiān)斗转星移(dǒu)

D.会计(kuài)奥秘(ào)憎恶(wù)惟妙惟肖(xiào)

2.下列词语没有错别字的一项是()

A.痴心妄想 络绎不绝 雷历风行 闻名遐尔

B.行云流水 欲擒故纵 五彩缤纷 星罗棋布

C.不屑置辨 心驰神往 怨天忧人 汗牛充栋

D.如愿以尝 依山傍水 赫然在目 名负其实

3.依次填入下列句子横线处的词语，最恰当的一项是()

①画家的心应该像一面镜子，永远把它所 事物的色彩射进来。

②平凡的人，好像都是一个 铸成的，太类似了!

③舜在 继位人时，十分注重接班人的群众基础。

A.反映 模型 考察

B.反应 模型 考查

C.反应 模样 考查

D.反映 模样 考察

4.下列句子中加点的成语使用正确的一项是()

A.一浪高过一浪的涨价风潮，使杭州房地产成了炙手可热的话题。

B.“崇尚科学，反对迷信愚昧”图片展将伪科学的真面目暴露得淋漓尽致。

C.在美伊战争中，最让全世界文史专家痛不欲生的是伊拉克国家博物馆惨遭洗劫。

6.克隆技术 篇六

摘要：抑制性差减杂交技术是一种差异性基因克隆的新技术，它对研究细胞生殖、发育、分化、衰老及死亡等生命过程中有关基因的差异表达及相关基因的分子克隆提供了有力的技术工具。简要概述了抑制性差减杂交技术的基本原理、优越性、缺陷及其在相关基因克隆方面的应用研究进展。

关键词：基因克隆;抑制性差减杂交;应用

生物体的生命过程伴有异常复杂的生物生化变化，是生物体内相关基因的有序表达和调控的结果。对相关差异性表达基因进行深入研究，能够更加深入地了解生物体的生命活动规律。目前，分离差异性表达基因的主要技术为杂交技术(subtractive hybridization)和差示筛选技术(differential scre-ening)，但这些技术存在重复性差、敏感度低等缺点。随着现代 PCR 技术的发展，一系列基于 PCR 技术的分离差异性基因表达的新技术被开发出来。SSH技术就是一种利用抑制性 PCR 和以差减杂交技术为基础的一种简单、快速地分离差异性表达基因的方法，该技术在研究基因克隆、基因表达及基因功能等方面有明显的优势[1].笔者对使用 SSH 技术进行研究的应用现状及其未来前景进行了简单介绍，旨在使 SSH 技术的应用得到更加深入的认识。

1SSH技术的过程及其优缺点

1.1SSH技术的过程

SSH 研究应用的材料可以是基因组 DNA,也可以是 c DNA,用于分离克隆 2 个样品中特异基因或者是差异性表达的基因。基本过程是：抽提 2 种不同生物体的 DNA 或 c DNA;将经限制性内切酶消化后的 Tester DNA 分为 2 个部分，分别与 2 种接头连接;再将这 2 个部分序列于过量酶切的 Driver DNA杂交，当这 2 个部分 DNA 被最终混合杂交后，就允许了同源性的单链 DNA 分子杂交;通过 PCR 扩增、克隆即可分析所差减的序列。

1.2SSH技术具有的优点[2]

高效高速。在一次 SSH 杂交试验过程中，就可以同时分离出上百个差异性表达的基因。灵敏度高。在退火时，高丰度的单链 DNA 同源杂交的速度快于低丰度的单链 DNA,导致原来在丰度上有差别的单链 DNA 在相对含量上能够达到一致，从而对于低丰度的基因也可以通过基因克隆表达出来。假阳性率低。经过 2 次杂交和 2 次 PCR 扩增选择性地扩增差异表达目的 DNA ，提高了特异基因的筛出率，使得假阳性率大大降低。简单易行，对仪器设备要求不高。背景低、重复性高。

1.3SSH技术存在的不足[2]

基因组中酶切位点较少的不适用 SSH 技术;分离到的差异表达基因片段，还需要扩增全长;起始材料相对要求较多，不适于来源困难的样品;对试验材料的要求较高，试验材料间差异性要求较低。

2SSH技术的应用

2.1SSH技术在医学上的应用

孙守娟等[3]采用 SSH 技术 ,构建了舌鳞癌 Tca8113 细胞系中高、低醛脱氢酶活性细胞差异表达基因 c DNA 文库，用 Trizol 分别提取 2 个细胞的总RNA;用 SSH 技术对 2 组 RNA 进行差异基因筛选和扩增，克隆片段均匀分布在 250~750 bp,无假阳性克隆。测序结果经同源性比对分析可知 ,与肿瘤有关的基因有SLC25,A13 NPC1,KLHL2,BARD1,WAPL,Notch2,EEF2K.车红花等[4]通过 SSH 技术，克隆了受病毒攻击的宿主细胞中被中药有效成分调控的基因，结果显示，核糖体蛋白 L27a 在中药组中高表达，病毒组中表达减弱或被抑制;益气活血中药复方能够影响受 CVB3 攻击的宿主细胞核糖体蛋白 L27a 的表达，有效保护心肌、阻断病程进度，实现治疗病毒性心肌炎的目的。

李守明等[5]采用抑制性差减杂交技术，鉴定母鼠铅暴露后代海马差异表达基因，构建了一个近200 个克隆的差减基因文库，得到 93 个有效克隆，从中克隆和鉴定了母鼠铅暴露致使学习和记忆能力显着下降的幼鼠中海马差异表达的基因，共 43种不同的基因以及 4 种未知功能基因。这些基因包括一些看家基因和一些与细胞蛋白折叠、信号传导、应激响应及 DNA 甲基化相关功能的基因。

2.2SSH技术在植物学上的应用

刘蕾等[6]应用 SSH 筛选植物青枯菌致病相关基因，研究该菌株致病力分化机理，以 Po82 为待测菌株，构建了抑制性差减杂交文库，结果表明，具有较高的接头连接以及文库构建效率，插入片段平均长度为 300 bp,文库构建质量较好。对文库中随机挑取阳性克隆进行测序，共筛选出 44 个 Po82 菌株差异基因。生物信息学分析结果表明，所得差异基因主要涉及新陈代谢、膜结构、转坐酶、毒力、分泌蛋白、转录因子以及未知功能等。闵卓等[7]以赤霞珠葡萄新梢上冬芽和夏芽为材料(夏芽作为驱动方，冬芽作为试验方)，采用 SSH 技术构建冬芽和夏芽的c DNA 文库，筛选冬芽和夏芽差异表达的基因片段，结果发现了一些在冬芽中表达频率较高的基因，如编码 MADS FLC-like 蛋白、钙依赖蛋白激酶、NADP依赖型的苹果酸酶、细胞壁水解酶、细胞壁松弛蛋白、外被体蛋白β亚基、热激蛋白、衰老相关蛋白、细胞色素 P450、细胞壁关联蛋白等基因;同时还认为，线粒体蛋白基因、开花相关基因、未知蛋白基因、ATP 合成酶β亚基基因、MADs FLC-like 蛋白基因等与葡萄芽生理休眠具有相关性。叶晓明等[8]以温敏雄性不育系 K121S 在可育温度 10℃下和不育温度 26℃下三核期花蕾为材料，以可育温度下的c DNA 为驱动子，采用 SSH 技术构建了不育温度下SSH 文库，随机挑选 97 个阳性菌落测序，得到 20个表达序列标签(EST)，包括与 ATP 合成酶β亚基、Rubp 羧化酶小亚基同源的 EST 等，为进一步获得育性转换相关基因和揭示 K121S 的育性转换分子机制奠定了基础。

2.3SSH技术在微生物学上的应用

李淼等[9]采用 SSH 技术寻找副猪嗜血杆菌的毒力基因，以无毒力菌株 H465 和有毒力菌株 SW124为材料，构建了 SSH 文库，使用 Southern 杂交和PCR 鉴定对差异基因片段进行筛选结果显示，从构建的文库中得到 7 个特异性差异基因片段，其中，2个差异基因片段与功能未知蛋白基因有关，5 个片段分别与膜多糖磷酸酶 / 糖基转移酶、磷酸核糖甲酰甘氨脒合酶、荚核糖体蛋白丙氨酸、转移酶噬菌体重组蛋白和 ABC 型硝酸盐，碳酸氢盐 / 磺酸盐转运系统周质蛋白等编码的基因有同源性。

祝昊丹[10]采用 SSH 技术将无毒株 SH040917SS9与强毒株 SH040917 进行杂交，共获得 61 个毒力特异的基因片段，结果表明，这些片段与 30 种不同的蛋白编码基因具有同源性，包括类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶、DNA 核酸酶、溶血素相关蛋白酶、苏氨酸磷酸化蛋白酶等。

戴建君[11]采用 SSH 技术对禽致病性大肠杆菌菌株和人尿源性大肠杆菌差异性表达基因序列进行了相关研究，结果发现了 28 个新毒力基因片段，并对这些基因片段流行病学进行了调查研究，发现大部分新的毒力基因与流行病学有较大的相关性。

2.4SSH技术在动物学上的应用曲

宪成等[12]应用 SSH 技术构建了黄鳝 IV 期卵巢和间期性腺的`差减 c DNA 文库，正向差减杂交以间期性腺为试验方，IV 期卵巢为驱动方;反向差减杂交以 IV 期卵巢为试验方，间期性腺为驱动方，将获得的差减 c DNA连接质粒载体，然后转化大肠杆菌 DH5α，最后获得的正、反向差减文库分别含461,678 个重组子。经 PCR 扩增鉴定，插入片段范围为 200~2 000 bp.随机选取正、反文库共 100 个阳性克隆测序分析，得到 90 个有效基因片段，与Gen Bank 进行 BLASTx 和 BLASTn 同源比对，进一步从文库中选取 2 个基因用于半定量 RT-PCR,对文库质量进行验证，结果表明，所建文库能够达到富集 IV 期性腺差异表达基因的目的。黄鳝性腺差减文库的构建，为进一步分离、鉴定黄鳝性腺发育和性逆转的相关基因奠定了基础。

李超等[13]利用 SSH 技术，以链球菌疫苗免疫前后罗非鱼白细胞 c DNA 为材料，构建了罗非鱼免疫前后正、负 2 个 c DNA 差减文库，并采用地高辛(DIG)标记差减文库 c DNA 作为探针，进行差异表达片段的筛选鉴定，结果显示，2 个文库重组率均在90%以上，插入片段在 300~900 bp,接头连接效率超过 50%,差减效率非常高，阳性率均超过 70%.杂交筛选后，对正、负文库各挑选 30 个阳性克隆进行测序组装聚类，正、负文库分别获得 16,18 条 EST,所得序列经 Gen Bank 同源性分析，正、负文库分别有 10,11 条 EST 获得功能注释，且分别有 6,7 条unigene 没有同源性匹配，定为未知新基因。

刘晶等[14]采用 SSH 技术，研究营养素对皱纹盘鲍基因表达的影响，对构建的文库中 48 个克隆进行了测序，结果发现了 32 个已知功能基因和 16 个新基因。王嘉等[15]采用 SSH 技术研究皱纹盘鲍 Vc缺乏诱导的差异表达基因，共获得了 63 个基因片段，其中，已知功能基因有 34 个;在 c DNA 文库中获得 39个片段，其中，已知功能基因有 21 个，包括细胞代谢、生物调节等相关基因。

另外，梅冰[16]利用 SSH 技术对溶藻弧菌的毒力相关基因进行筛选和鉴定研究，构建溶藻弧菌毒力菌株 SSH 文库，结果显示，所构建的溶藻弧菌毒力菌株的 SSH 文库含有 8 个已知的常见毒力相关功能基因，该文库还含有 166 个未知新基因，占文库中总基因数的 68.44%,溶藻弧菌的毒力基因很可能存在于这些未知新基因中。说明构建的 SSH 文库中 166 个未知新基因很有可能包含有溶藻弧菌的关键毒力基因，为溶藻弧菌毒力基因的鉴定和今后开展溶藻弧菌基因工程疫苗的研制奠定了重要的基础。

3展望

在现代生命科学研究领域中，差异基因的筛选和鉴定已成为现代分子生物学研究的热点。SSH 技术操作简单、所需试验仪器廉价、试验过程简单、阳性率高，分离差异基因提供了一种强有力的工具。随着 SSH 技术的不断改进，在生物研究的各个领域，如微生物学、动物学、植物学、医学等领域得到了大力的推广。在未来的发展中，SSH 将与其他分子生物学技术相结合，各取所长，为研究差异基因的表达提供新的技术手段。

参考文献：

[1]顾克余，翟虎渠。 抑制性扣除杂交技术(SSH 技术)及其在基因克隆上的研究进展[J]. 生物技术通报，,15(2)：13-16.

[2] Diatchenko L,Lau Y F,Campbell A P. Suppression subtractive hy-bridization:a method for generating differentially regulated or tis-sue-specific c DNA probes and libraries [J]. Proc Natl Sci USA,,93(12)：6025-6030.

[3]孙守娟，季平，邓诚，等。 基于舌鳞癌 Tca8113 细胞醛脱氢酶活性不同构建差异表达基因 c DNA 文库 [J]. 第三军医大学学报，,34(3)：226-230.

[4]车红花，张明雪，何伟，等。 益气活血中药复方对 CVB3 大鼠心肌细胞感染模型核糖体蛋白 L27a 表达的影响 [J]. 辽宁中医杂志，2012,39(9)：1862-1864.

[5]李守明，刘昌英，谢国秀，等。 应用抑制性消减杂交技术鉴定母鼠铅暴露后代海马差异表达基因 [J]. 中国当代儿科杂志，,12(10)：820-824.

[6]刘蕾，徐进，许景升，等。 应用抑制性差减杂交法筛选植物青枯菌致病相关基因[J]. 农业生物技术学报，2012,20(7)：745-755.

[7]闵卓，耿万刚，房玉林，等。 应用抑制消减杂交技术筛选葡萄冬芽和夏芽生理休眠相关基因 [J]. 中国农业科学，,47(5)：1029-1040.

[8]叶晓明，彭少丹，陈升位，等。 不育温度下油菜温敏雄性不育系SSH 文库的构建[J]. 云南农业大学学报，2014,29(1)：6-10.

[9]李淼，李春玲，宋帅，等。 应用抑制性差减杂交筛选副猪嗜血杆菌 4 型菌株可能毒力基因[J]. 华北农学报，2012,27(1)：57-62.

[10]祝昊丹。 猪链球菌 9 型毒力基因的筛选及鉴定[D]. 南京：南京农业大学，.

[11]戴建君。 禽致病性大肠杆菌 IMT5155 疑似毒力基因的鉴定及分析[D]. 南京：南京农业大学，2010.

[12]曲宪成，尚晓莉，程翠，等。 黄鳝性腺抑制差减文库的构建和分析[J]. 中国水产科学，2011,18(1)：23-28.

[13]李超，陈明，李莉萍，等。 罗非鱼免疫前后白细胞 c DNA 差减文库的构建及鉴定[J]. 西南农业学报，2010,23(4)：1286-1292.

[14]刘晶，张文兵，麦康森，等。 皱纹盘鲍外套膜耐维生素 E 缺乏消减c DNA 文库的构建[J]. 中国水产科学，,14(3)：383-389.

[15]王嘉，马洪明，麦康森，等。 皱纹盘鲍肝胰腺和肾脏维生素 C 缺乏诱导的差异表达 c DNA 文库的构建 [J]. 中国水产科学，2010,17(4)：619-629.

7.基于PXE技术的网络克隆的实现 篇七

1 PXE技术简介

PXE(Preboot Execute Environment)是由Intel公司开发的，工作于Client/Server的网络模式，支持工作站通过网络从远端服务器下载映像，并由此支持来自网络的操作系统的启动过程，在启动过程中，终端要求服务器分配IP地址，再用TFTP(Trivial File Transfer Protocol)或MTFTP(Multicast Trivial File Transfer Protocol)协议下载一个启动软件包到本机内存并执行，由这个启动软件包完成终端基本软件设置，从而引导预先安装在服务器中的终端操作系统。

PXE根据服务器端收到的工作站网卡MAC地址，使用DHCP服务给工作站指定一个IP地址，下面以工作站引导过程说明PXE的原理。

(1)工作站开机后，PXE Boot ROM获得控制权之前先做自我校验，然后以广播形式发出一个请求FIND帧。

(2)如果服务器收到工作站送出的请求，就会送到DHCP进行响应，内容包括工作站的IP地址、预设通讯通道及启动镜像文件。否则，服务器会忽略这个要求。

(3)工作站收到服务器发回的响应后则会回应一个FRAME，以请求传送启动所需文件。

(4)将有更多的讯息在工作站与服务器之间作应答,用以决定启动参数。Boot ROM由TFTP或MTFTP通讯协议从服务器下载启动镜像文件。

(5)工作站使用TFTP或MTFTP协议接收启动镜像文件后，将控制权转交启动模块，引导操作系统，完成远程启动。

2 网络克隆的前期准备

在网络克隆前，需要在服务器端安装Symantec Ghost网络克隆软件和PXE软件(本文采用3COM的DABS程序)，生成启动镜像文件和镜像文件的菜单文件，并设置TFTP和DHCP服务(本文采用免费的TFTPD32程序)。

2.1 生成基于PXE技术的远程启动镜像文件

(1)运行Symantec Ghost网络克隆软件中的“Ghost Boot Wizard”程序，预启动操作系统，选择“PC-DOS”，然后选择“TCP/IP Network Ghost Client Boot Image”选项。

添加工作站网卡的NDIS2 Driver，即DOS环境下的驱动程序，如没有可以从网卡的官方网站上下载，文件后缀名一般是.DOS，同时还有一个协议配置文件“PROTOCOL.IN-I”。以8139网卡为例，NDIS2驱动文件为“RTSND.DOS”,“Drive Name”为“RTSND$”。

以后的选项都采用默认设置，最后生成一个后缀名为.sys的文件，这里起名为“PXE.sys”，这个文件就是启动镜像文件。

(2)为了能够让工作站启动后自动进行克隆，需要对启动镜像文件进行编辑，改变Ghost参数设置。运行DABS软件中的“Boot Image Editor”程序，选择“Edit an existing file”选项，对“PXE.sys”文件进行编辑。

添加命令行：ghost-clone,mode=restore,src=@mc8139,dst=1-sure-rb。此命令行参数的功能是：设置工作站启动时为自动恢复镜像模式，指定Ghost服务端的会话名称为8139，将镜像文件恢复到工作站第一个硬盘(这就要求制作镜像文件时要将整个硬盘做成一个镜像文件)，克隆过程中的选项全部回答“确定”，克隆完成后自动重启工作站。应用中可根据实际需要对参数进行调整。

(3)运行DABS软件中的“Boot Image Editor”程序，选择“Create a PXE menu boot file”选项。运行后，添加刚才编辑好的“PXE.sys”并进行保存，生成一个PXE启动菜单文件，默认文件名为“mba.pxe”。

2.2 设置TFTP和DHCP服务器

(1)运行TFTPD32程序，单击“设置”选择，选择“TFTPD32服务器”和“DHCP服务器”，并将DHCP服务器绑定到服务器端IP地址以及选择“PXE兼容性”选项，设置选项如图1所示。

(2)运行“DHCP服务器”设置，设置IP分段始发地址、分段大小(根据工作站台数定义)、Boot文件(制作的菜单文件)、掩码(子网掩码)等选项，设置如图2所示。

3 网络克隆的实现

(1)在服务器端运行“Symantec GhostCast Server”，设置“Session Name”为PXE.sys中添加的Ghost命令行中的会话名“8139”并选择磁盘镜像文件，然后单击“Accept Clients”按钮，允许工作站端进行连接。

(2)将工作站BIOS设置为从网络启动，然后会通过TFTPD32服务程序，自动启动并下载PXE启动镜像文件。自动启动Ghost程序后会等待服务器端发送数据。

(3)将所有需要网络克隆的工作站都启动后，单击Symantec GhostCast Server程序中的“Send”按钮，然后正式开始网络克隆。

4 网络克隆中的问题

在对工作站进行网络克隆后，由于所有的计算机名、IP地址全部一样，所以需要对每台工作站进行更改。为了避免手工更改繁琐费时，可以使用ModiIP等软件自动更改计算机名和IP地址，这样就可以实现全自动的网络克隆。

5 结束语

基于PXE技术的网络克隆，实现了局域网内同一配置工作站的全自动系统安装与恢复，使得网管摆脱大量重复工作，提高了网络管理效率，保证了局域网络的正常运行。

参考文献

8.克隆技术 篇八

全球趋势走向城市化，政府文件的数字化和银行的安全性提高正不断增加NFC的采用，也一再显示安全芯片比以往任何时候都更加需要用来保护用户的数据、凭证和财务。同时，企图破坏安全芯片功能以窃取信息的攻击方式也日益复杂。藉由整合Intrinsic ID的PUF技术到恩智浦的安全微控制器SmartMX2，恩智浦大大提高了芯片的安全结构，并强化了NFC的移动支付，电子票务，电子政务和网络安全服务等的各式应用。

Intrinsic-ID的首席执行官Pim Tuyls指出：“人们对于各式的智能卡的安全疑虑一直加深，这都是因为日益泛滥的高难度入侵工具与技术，黑客用这些入侵性工具破解加密和密钥。我们相信，我们的PUF技术是非常适合用来克服这个问题，尤其是与恩智浦业界领先的安全IC解决方案结合之后。”

恩智浦半导体智能识别事业部执行副总裁兼总经理Ruediger Stroh指出：“虽然使用智能卡或是使用NFC手机内的智能卡功能，在世界各地越来越流行，但许多用户仍有安全疑虑。因此提供最高安全的电子ID卡，银行卡或NFC智能手机是很必要的。在SmartMX2芯片中采用PUF技术有助于减缓用户的疑虑，同时为智能生活解决方案带来更多的安全感和信任感，并为我们的客户提供一个关键的竞争优势。因此，我们非常高兴能与PUF领域的领导者Intrinsic-ID订立此合同。”

9.克隆技术 篇九

假如我会克隆，我要克隆一所我亲爱的母校 四川省资阳市乐至县希望小学六.二班杨成云要毕业了，对生活了六年的母校充满了留恋的感情，但是，即将面临的是陌生的新学校，

假如我会克隆，我要克隆一所我亲爱的母校

。要是能把母校的一切都搬到新学校旁来，这样，就算是陌生的学校。有母校的陪伴，相信，一定会感到温暖的。

现在的克隆技术很先进，能克隆出任何东西。对!就用克隆技术来克隆母校，让更多的小朋友能在这温暖的学校里生活。

说干就干，我约好几位克隆专家一起来商量，制定了克隆计划,觉得应该一座一座地克隆，

作文

《假如我会克隆，我要克隆一所我亲爱的`母校》()。

首先我们要克隆的是洁白无暇的教学大楼。同学门抬来了庞大的克隆机器，我一按电钮，克隆机器就启动了，只见一股巨大而强烈金黄色的光芒笼罩着教学大楼，射得我们连眼睛都睁不开。不一会儿，光芒散去，在克隆机的大屏幕上呈现着我们学校教学大楼的图样。我再一按电钮，又一道光芒在新学校旁的空地上照耀着。慢慢地、在金光笼罩的空地上出现了母校教学大楼的影子。光芒开始减弱了，一座和母校教学大楼一模一样的楼房，在短短的十几分钟里奇迹般地出现在我们的面前。“啊!克隆成功啦!”有人叫道。这时，从克隆出的教学大楼中，传出了同学们嬉戏游玩的声音，有同学惊讶地叫道：“一模一样的教学大楼，奇怪，连校长、老师都一样，真是太不可思议了。”

克隆完了教学大楼，我们接着又用同样的办法克隆了操场、花坛等。通过先进的克隆技术，另一座和母校完全一样的新学校诞生了，而以前的母校仍原封不动地矗立在哪儿。

10.假如我会克隆 篇十

现代世界虽然非常精彩，但是并不完美。假如我会克隆，我要把这个世界的不足点补齐了。

假如我会克隆，我要克隆出一片片森林，让森林为我们阻挡风沙，防止洪水泛滥。还要在沙漠上种植大片片的森林。让沙漠地带变成一片片绿洲，让森林给花儿鸟儿鱼儿……一点自由的空间。

假如我会克隆，我在克隆出很多的钱，我会走进文具店抱出大捆的铅笔、钢笔、作业本、橡皮……把这些东西再送给希望工程，然后看着那些失学儿童高兴地拿走这些学习用品坐在窗明几净的教室里聚精会神地老师课。

假如我会克隆，我要克隆出许多动物。现在世界上的动物不少都己灭绝，许多地方都荒无人烟了。

假如我会克隆，我要把那些濒临灭绝的动物克隆出来，让这个世界充满光辉，让生态得到平衡，让人类的朋友——动物，重返大自然。现在世界上许多地方都有旱灾，我要克隆出大量河流，解决水资源紧缺的问题。现在，我国的黄河因水资源缺乏，造成许多地方干涸，如果我会克隆我要让咱们的母亲河重新变得气势磅礴。

假如我会克隆，我要克隆出古代许多着名建筑物。让那些因年代久远而风化的建筑得到重生，让人们看到长城的雄观，看到古巴比伦空中花圆奇观……让这些古建筑恢复原貌，让我们更好的欣赏古代劳动人民的聪明智慧。

假如我会克隆，我要克隆出人的器官，让那些病人远离痛苦。

11.克隆羊之父反对克隆人/等 篇十一

据国外媒体近日报道，负责登记可居世界的一个项目的研究人员宣称，位于我们太阳系外的银河里的7颗行星或许适宜生命生存。

“可居住性行星实验室”的门德兹科研组2011年12月开始进行可居系外行星目录项目。需要评估这些最近现身的世界适宜生命生存的程度是促使该项目诞生的原因，它被当作把这些新行星介绍给公众的一个途径。研究人员表示，有近80颗已被证实与地球大小类似的系外行星，但是只有少量与主星的距离正好适合地表存在液态水。

实验室也可生成人体组织

与肾脏或肝脏不同，气管并不在通常的器官移植名单之列。不过，随着干细胞技术的发展，病人可以自己来生长新的气管。卡罗林斯卡学院的研究者近期刚刚造出了第二个人造气管。利用合成微纤维和从病人骨髓采集的干细胞，研究者在实验室里生成了新的气管，并成功连接了患者的鼻子、口腔和肺部。在第一个病例中，一位死者捐献的气管为另一位西班牙妇女的干细胞提供了生长支架。而在最新的实验中，研究者利用生物工程矩阵来培养干细胞，这项技术在未来具有广阔的前景，几乎所有类型的干细胞，都可以以此为基础生长出各类型的器官。

人类智力或起源于古老遗传事故

据物理学家组织网近日报道，英国研究人员发现，使人类能够思考和推理的基因开始进化于5亿年前。从这一刻起，人类拥有了学习复杂技能、分析形势、灵活思考的能力。发表在《自然·神经科学》上的此项研究成果，同时也揭示出行为进化和脑部疾病起源之间的直接联系。生活在5亿年前的一种简单无脊椎动物经历了一场“遗传事故”，导致形成了这些基因的额外副本。这种动物的后代受益于这些额外的基因，最终导致了包括人类在内的行为复杂的脊椎动物的出现。

玛雅洞穴不留积水存尸体

据英国《每日邮报》报道，近日，德国电影导演诺伯特·范德和考古学家在墨西哥尤卡坦半岛探访了被古玛雅人称为“地下世界通道”的地下洞穴。这里的地下洞穴中充满了积水，积水中躺着数百具人类遗骸。在石器时代，这些洞穴中并无积水，当时被用来存放尸体。后来，古玛雅人开始相信这些洞穴直通“恐惧之地”，因此对它们产生了崇拜。现在这些洞穴成为新3D影片《死者牢笼》的拍摄主题，该影片将于2013年上映。范德为在这些洞穴中采景耗费了巨资。

克隆羊之父反对克隆人

1996年7月5日，一只名叫多利的小绵羊来到这个世界，引起轰动。因为它是世界上第一只克隆动物，与多利同时闻名全球的，便是英国科学家伊恩·威尔默特，正是他领导的科研小组培育出了这只不同寻常的小多利。如今，伊恩·威尔默特已不再从事克隆研究，而是转向干细胞研究，而对于克隆出羊的伊恩来说，克隆人是不可接受也是不能实施的技术。他认为这是对个体生命的不尊重。

人均有400个DNA缺陷

英国的一项研究表明，每个人的DNA平均有400个缺陷。其中绝大多数是“隐性”突变，不影响健康，不过若传给后代可能会引发问题。其他缺陷则与晚年出现的癌症或心脏病等疾病有关联。证据来自绘制普通人基因差异的“1000基因组”计划。

在这项研究中，研究人员破译了欧洲、南北美洲和东亚的1000名外表看来健康的人的整个基因序列，以观察是什么让人类个体间存在差异，以及协助寻找基因与疾病的关联。结果显示，一个健康的普通人平均约有400个具有潜在破坏性的DNA变异和两个众所周知与疾病有关的DNA变异。

伽马射线暴或引发物理革命

据美国太空网报道，来自宇宙中最剧烈的爆炸现象正让科学家们有机会探究时空的本质。这是最近日本宇宙航天机构所属的伊卡鲁斯探测器对宇宙中的伽马射线暴进行观测之后得到的成果。日本的伊卡鲁斯飞船搭载的一台仪器名为“伽马射线暴偏振器”（GAP），借助这台仪器获得的数据，日本大阪大学科学家藤间谦二在一份声明中表示：“这项结果为量子论给出了一个基本的限定，这将会是一个梦幻般的理论，它将有望最终统一爱因斯坦的相对论和量子论。”

你有数学恐惧症吗？

在新浪微博组织的“你有数学恐惧症吗？”这一热门话题下，已经有超过7000人参与讨论，其中近八成的人选择了“有，看到数学就头疼”。还有人直接将此作为微博名称。按照美国芝加哥大学心理学系伊恩·莱昂斯博士的说法，全世界大约每5个人就有一个数学恐惧症患者。

在近期发表于美国《科学公共图书馆（综合卷）》杂志的论文中，莱昂斯指出，对那些恐惧数学的人来讲，数学总是和紧张、害怕、焦虑联系在一起。莱昂斯的老师贝洛说，很多人惧怕数学，但并不害怕在大庭广众之下谈论自己的恐惧，相比之下，“你很少听到身边来来往往的人，满是炫耀地说自己连书都不会读”。

12.克隆技术 篇十二

1 关于PXE的理论依据及技术实现

PXE (Preboot Execution Environment的缩写) 是由Intel公司开发的技术, 其工作模式是基于“客户端/服务器”的网络模式。在其整个运行过程中, 客户端以广播形式发出一个请求帧, 服务器收到请求, 就会送回一个回应, 内容包括用客户端的一些网络协议信息包括IP、子网掩码、网关、DNS等信息, 终端收到回应信息后, 再通过TFTP服务或MTFTP协议有服务器端下载一个启动镜像文件 (pxe启动文件) 到本机内存中并执行。PXE可以引导多种操作系统, 具有安装方便, 适用范围广泛, 安全、可维护性更强等优点。

关于另一种网络启动技术RPL, 与PXE技术相比, 它们的不同之处为:一个是静态路由, 一个动态路由。不难理解:RPL是根据网卡上的ID号加上其它的记录组成的Frame向server发出请求, 而server那里早已经有了这个ID数据, 匹配成功则进行远程启动;PXE是则是根据服务器端收到的工作站MAC地址 (就是网卡号) , 使用DHCP服务给这个MAC地址指定一个IP地址, 每次重启动可能同一台工作站有与上次启动有不同的IP, 动态分配地址。

在这里以一个客户端计算机引导过程来阐明PXE的启动原理:

(1) 客户端电脑开机后, PXE ROM在获得控制权之前先做自我测试, 然后以广播形式发出一个请求帧。

(2) 在服务器端, 当服务器收到客户端计算机所送出的要求后, 就会立即送回一个DHCP回应。其内容包括客户端所必需网络协议信息 (诸如:IP地址, 预设通讯通道, 及开机镜像文件等信息) 。

(3) 然后, 客户端计算机在收到服务器发回的响应后, 将再次进行回应一个FRAME, 以请求传送启动所需文件 (用来启动客户端系统) 。

(4) 之后, 将有更多的讯息在客户端计算机与服务器之间作应答, 用以决定启动参数。在此过程中客户端已于服务器进行通讯, 客户端将通过TFTP通讯协议从服务器下载开机镜像档, 这个镜像档就是用来启动系统的操作系统映象文件 (DOS或者是winpe等) 。

(5) 客户端计算机使用TFTP协议接收启动镜像文件后, 将其控制权转交启动模块, 引导操作系统, 完成远程启动。

2 网络克隆所需的工作环境

首先, 必需保证局域网的网络的畅通, 其网络的构架一般应遵循568A (或568B) 标准。服务器端一般应选用千兆网卡, 以保证网络通讯的快速高效;服务器安装WINDOWS Server 2003操作系统, 安装DHCP服务 (或者是其他程序提供的DHCP服务) 以便于服务器能将IP地址动态地分配给客户端计算机。服务器还需要安装TFTP服务软件, TFTP服务是用来在客户机与服务器之间进行简单文件的传输, 以便客户端下载启动所需的镜像文件。其次, 服务器还需要安装用来网络多播克隆所需的GhostCast Server多播服务软件, 用于将备份系统的镜像克隆到客户端计算机。客户端计算机要求启用PXE选项, 启动时通过LAN进行启动。

3 网络克隆的准备工作

建立完整的PXE网络Ghost环境需要:DHCP服务器、TFTP服务器、GHOST多播服务器、支持网络克隆的镜像文件 (包含ghos客户端程序) 、客户机支持PXE网络启动。需要的软件主要有:

(1) Ghost服务器版 (GhostSrv.exe:建立ghost广播服务器) ;

(2) Tftpd32.exe (建立TFTP服务, 用于客户端文件传输;建立DHCP服务, 用于给客户端自动分配IP) ;

(3) MAXDOS7_PXE版 (MAXDOS.PXE:PXE远程启动文件, 必不可少的;MaxDOS7.sys:MaxDOS7的系统文件, 启动DOS系统, 加载网卡驱动, 加载其他DOS工具, 这里PXE网克最主要就是加载网卡驱动启动ghost客户端并进行网络连接) 。

3.1 配置客户端计算机:设置BIOS相关选项从网络启动

修改客户端计算机BIOS信息的启动顺序, 将第一启动设备设为网络启动, 如果是集成网卡还要在“IntegeatedPipheals”选项中将“Qnboad LAN Boot ROM”选项启用。部分品牌机还需要修改网卡的中断号才能实现PXE网络启动。

目前, 常用计算机中基本都支持PXE启动, 其PXE启动设置方式一般是:机器启动时根据屏幕提示按下Shlft+F10功能键进行设置, 在启动类型中选择PXE及其它相关选项, 开启网络启动选项即可。

3.2 配置网络克隆的服务器端

服务器操作系统使用Windows Server 2003, 需要的软件:GhostSrv.exe, Tftpd32.exe。

(1) 获取PXE启动文件:下载Maxdos7的pxe版本, 解压获取maxdos.pxe及maxdos7.sys。

(2) 启动Tftpd32软件, 配置好TFTP服务和DHCP服务, 用于客户端进行远程连接到服务器。

(a) 具体配置:设置基本目录、必要的TFTP服务器和DHCP服务器以及相关的DHCP选项和TFTP选项等, 设置完成后点击确定。

(b) 设置DHCP服务:设置服务器地址、及地址池的起始地址和地址池大小、网关、子网掩码等信息。

(3) 启动GhostSrv.exe软件, 配置Ghost广播服务。

(a) 设置会话名称, 如:max (使用maxdos.pxe时, 默认的会话名称为max, 以便客户端自动连接到会话)

(b) 根据需要设置:恢复镜像 (网络克隆) 。

(c) 选择需要恢复的系统镜像文件 (gho文件) 。

(d) 设置克隆参数:克隆整盘 (或克隆分区) 。

设置完成后, 点击“接收客户端”, 这样, 只要客户端一旦连接到服务器, 就会自动建立会话。

4 网络多播克隆的实施

在保证正常的网络畅通的情况下, 正确配置服务器, 保证服务器端运行GhostSrv网络多播克隆程序及TFTP服务、和DHCP服务。

客户端计算机在启动时, 根据前期设置从PXE网络启动。客户端计算机通过网络启动时, 会自动搜索局域网内的DHCP服务器来获取网络IP, 客户端计算机分配到正确的IP后将进一步连接到多播服务器, 通过TFTP协议来获取有效的远程启动镜像文件, 当客户端下载完启动镜像后会自动操作系统。在这里使用的是MAXDOS的pxe启动文件, 客户端会自动启动dos系统及内置的程序, 并根据客户端硬件情况自动安装网卡驱动、自动启动ghost客户端软件并自动连接到ghostsrv服务器。当所有客户端计算机都连接进来后, 在服务器端点击“发送”, 即可对网内的客户端计算机开始网络多播克隆, 直至多播克隆完成。

相关后续工作, 网络多播克隆完成后, 重启客户端, 运行准备好的批处理文件更改客户端计算机的相关网络标识信息设置。

在网络多播克隆的具体实施过程中, 网络克隆64台计算机, 系统镜像文件2.4G, 整个过程耗时约50分钟。因此说PXE网络硬盘克隆技术可以快捷、安全地恢复系统, 使得繁琐的系统维护工作简单化。

参考文献

[1]吴水清.网络克隆技术在机房管理中的应用[J].渝西学院学报 (自然科学版) , 2005, 4 (1) :49.

[2]马传宝.基于PXE技术的无盘WIN98局域网的建立[J].广东广播电视大学学报, 2001, 10 (37) :18.

[3]王健.轻松玩转注册表[M].重庆:重庆大学出版社, 2001.

13.奇妙的克隆教案 篇十三

教学目标：

知识与能力

（1）了解有关克隆的科学知识。

（2）理清本文的说明顺序，把握本文所运用的说明方法。过程与方法

整体感知文意，根据阅读要求训练学生筛选信息，逐步提高科普文的阅读能力。情感、态度、价值观

（1）培养学生严谨求实的科学态度和勇于创新的科学精神。

（2）树立正确的科学观，全面看待科学的发展，实现科学精神和人文关怀的统一。

教材分析

本文是人教版八年级语文上册的一篇科学小品，文章用小标题的形式，按照逻辑顺序，有条理的介绍了什么是克隆、克隆的试验的应用及发展、克隆技术的理性思考。文章紧紧围绕文题中“奇妙”两字生动、通俗的向读者介绍“克隆”这一最新的尖端科技的知识。

教学重点

通过竞赛，了解课文内容。利用收集的有关克隆资料展开辩论，培养学生锲而不舍的精神和口语交际的能力。

教学难点

培养学生严谨求实的科学态度和勇于创新的科学精神，引导学生养成搜集信息、筛选信息的学习习惯。

教学方法

课前让学生利用图书馆、网络搜索自己需要的信息和资料，培养获取信息的能力。在授课中，采用小组合作探究法、讨论点拨法，运用多媒体辅助手段教学。

教学过程

第一课时

导入：展示富贵竹图片，师：同学们，你们知道图上植物的名称吗？ 生：富贵竹

师：对，那你知道怎样让一株富贵竹变成两株吗 生：———

师：我们只要将富贵竹剪取一段茎段插穗，待生根后即可成活。原来的一段茎就变成了一株新的富贵竹。

展示柳树图片

师：请同学们将右图上的文字朗读一遍 生：有心栽花花不开、无心插柳柳成荫。

师、这里出现了一个词“插柳”，想一想他意味着什么呢？ 生：————

师：柳树也可以采用扦插繁殖，剪取一段柳枝，插到泥土里，待其长出根须，就可以移植。扦插繁殖的柳树可以保持母树的优良特点。

同学们，无论是富贵竹还是柳树他们都有一个神奇的功能。那就是可以依靠自身的一部分来进行繁衍，这其实就是克隆。下面我将陪大家一起学习第十七课《奇妙的克隆》

作者介绍：谈家桢先生是国际著名遗传学专家，是我国现代遗传学奠基人，同时也是一位杰出的科学家和教育学家。

一、识读生字，扫清阅读障碍

Náng kâ lóng yăn pēi chán chú 囊 克隆 繁衍 胚胎 蟾蜍 lín jĭ zhuī qī yāo fū 鳞片 脊椎 两栖 夭亡 孵化 jì xiàn mì yì bŭ 鲫鱼 腺素 分泌 免疫 哺乳 zuŏ qiâ chù 一撮 切实 牲畜 cuō qiē xù 撮合 切割 畜牧

二、快速浏览课文，整体感知文意

请同学们边读边思考以下问题，带着问题读课文。

1、克隆是什么？

2、本文在结构上有什么特点？

答案1：书上：这种来自一个祖先的无性繁殖的后代群体也叫无性繁殖系，简称无性系。

定义：克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。

答案2：四个小标题——克隆是什么、克隆鲫鱼出世前后、克隆绵羊“多利”、克隆技

术造福人类

小标题的作用：1.使用小标题，便于将众多的材料分门别类地组织，从多个方面或多个角度来展示材料、表达主题，使行文条理清楚；2.能吸引读者：3.让读者在通读全文前对文章的主要内容有一个概括性的了解；

4.在阅读过程中更快更准确地理解文章内容并了解写作意图；5.在阅读全文后留下更为深刻的印象。

三、深入探究课文

第一节 克隆是什么

一个细菌经过20分钟左右就可一分为二；一根葡萄枝切成十段就可能变成十株葡萄；仙人掌切成几块，每块落地就生根；一株草莓依靠它沿地“爬走”的匍匐茎，一年内就能长出数百株草莓苗„„

说明方法：举例子

想一想作者为什么列举植物、动物界中人们熟悉例子？

答案：从我们容易理解的常见的现象写起，把高深的科学知识说的简明易懂。请找出天生具有克隆本领的动植物的特点？

答案：都是生物靠自身的一分为二或自身的一小部分的扩大来繁衍后代。

无性繁殖的英文名称叫“Clone”，音译为“克隆”。实际上，英文的“Clone”起源于希腊文“Klone”，原意是用“嫩枝”或“插条”繁殖。时至今日，“克隆”的含义已不仅仅是“无性繁殖”，凡来自一个祖先，无性繁殖出的一群个体，也叫“克隆”。这种来自一个祖先的无性繁殖的后代群体也叫“无性繁殖系”，简称无性系。clone[英][kləʊn] [美][klon] 说明方法：作诠释

对克隆一词进行溯源并作出解释，让我们进一步理解克隆。小结：溯源“克隆”一词并介绍“克隆”是什么（克隆的含义）

补充：作诠释与下定义的区别。

• 意义：作诠释是从一个侧面，在事物的某一个特点做些一般性的解释。下定义是用简明的语言、科学的术语对某一概念的本质特征作规定性的说明。

• 区别：下定义要求完整，并且要从一个方面完整地揭示概念的全部内涵。作诠释，只要揭示概念的一部分内涵就可以了。二者常用“某某是什么”的语言形式。一般来说，“是”字两边能够互换，就是下定义；如果不能互换，就是作诠释。• 例句：

1、无理数是无限而不循环的小数。例句：

2、赵州桥是世界著名的古代石拱桥。

说明方法：例1是下定义，例2是作诠释

第二段：紧承前文，从植物的克隆写到动物的克隆，对克隆的介绍更进一步。

孙悟空经常在紧要关头拔一把猴毛变出一大群猴子，猴毛变猴就是克隆猴。

说明方法：做引用。以此作结把科学技术写的富有趣味。小结：溯源“克隆”一词并介绍“克隆”是什么（克隆的含义）

第二节 克隆鲫鱼出世前后

1、这一节的说明顺序是什么？

答案：逻辑顺序

作者没有用时间顺序来介绍“克隆”实验，而是用两条线索来组织材料： •

（1）以实验对象为线索：鱼类——两栖——哺乳动物

（2）以中外科学实验为线索：中国—鲫鱼、黑斑蛙、新鱼种（鲫鲤鱼）• 外国—蟾蜍（英国）、小鼠（美国、瑞士）

2、作者为什么不以时间顺序来写克隆实验 呢？这样安排有什么好处？

答案：这一节说明顺序的安排体现了作者的写作技巧：

•（1）①以实验对象即由鱼类、两栖类到哺乳类为线索来安排材料，便于认清克隆技术的发展脉络。体现了科学家们对科学的追求是永无止境的。科学研究是一个不断求索探究的过程。同时也为下文写“克隆羊多利”的诞生提供了科学基础，做好行文的铺垫。②按生物顺序由低级到高级来安排符合人们的认知规律。再说无性繁殖属于低级繁殖，动植物越进化越高级就越难以进行无性繁殖。这一顺序说明克隆技术在不断发展。

•（2）以中外科学实验为线索，这样写突出了中国科学家在克隆实验方面的研究成果和贡献。

• 小结：“克隆鲫鱼出世前后”勾勒了克隆技术的发展脉络，为我们介绍了中外科学家所进行的克隆实验及实验进展情况，突出了中国科学家在克隆实验方面的研究成果和贡献。（克隆实验）

第二课时

第三节 克隆绵羊多利

展示克隆羊图片及介绍

姓名：多利 性别：雌 种族：哺乳纲、牛科、绵羊 生日：1996年7月5日 出生地：苏格兰 基因父亲：无 基因母亲：芬多席特种白绵羊 线粒体母亲：一只苏格兰黑脸羊 生育母亲：另一只苏格兰黑脸羊 死亡：2003年2月14日

1、“克隆羊”的诞生为什么在全世界引起轰动？

答案：主要原因是它标志克隆研究取得新的进展和重大突破，而且“这个结果证明：动物体中执行特殊功能、具有特定形态的所谓高度分化的细胞与受精卵一样具有发育成完整个体的潜在能力。也就是说，动物细胞与植物细胞一样，也具有全能性。”

这一突破意味着它既可能是人类的福音，也可能是人类的凶兆。也就是说，克隆技术是一把双刃剑。它即可以为人类造福，也可能危害于人类。

小结：这一节详细描述了克隆羊“多利”出世的经过，揭示了克隆羊成功的重大意义和产生的巨大反响。

这一节是按照时间顺序安排材料的。

标志词：“‘多利’绵羊是如何‘创造’出来的呢？„„先给„„与此同时„„手术完成后„„然后„„到去年七月„„‘换核卵’一步一步发展的结果，因此是‘克隆羊’”。

（克隆实验的发展）

第四节 克隆技术造福人类

展示漫画“克隆的好处”

1、课文从哪些方面写了克隆技术会给人类带来极大的好处？

答案：课文主要从三方面来写克隆技术造福于人类。

1、克隆可以有效地繁殖具有“高附加值”的牲畜”；

2、克隆可以用来挽救珍稀动物；

3、克隆对于人类疾病的防治、寿命的延长具有重要的意义。

小结：文中说明了克隆技术会给人类带来极大的好处，但作者并没有沉浸在盲目的乐观当中，而在结尾处提出了关于“克隆”牵涉到道德伦理问题的冷峻思考。

（克隆造福人类和对克隆的思考）

四、理清文章脉络

克隆的含义——克隆实验及发展——隆造福人类和对克隆的思考 逻辑顺序 • • 用小标题把全文分为四部分，分别从不同侧面说明，同时前后又有紧密联系。文中先写克隆的含义，接着写克隆实验，再写克隆的发展，最后写克隆对人类的造福和对克隆的理性思考。全文采用了逻辑顺序说明事理，逐层深入，步步推进。

五、写作特点

• 本文在写法上很有特点，可从以下几个方面来探讨。

1、表现在文章结构安排上，用四个小标题把全文分为四部分，这四个部分从不同的侧面说明克隆，但前后又有紧密的逻辑联系。

2、文中运用举例子、作比较、列数字和作诠释等多种说明方法，把艰深的科学道理作了深入浅出的说明。

3、文中浸透了作者的思想感情，学生不仅从中获得科学知识，而且受到教育，得到启迪。

六、揣摩语言

• 同学们，在科学的道路上是没有平坦的大道可走的，科海泛游靠的是渊博的科学知识，精湛的科学技术、严谨求实的科学态度，坚持不懈、永不言败的科学精神。请从课文中找出能表现科学家严谨、求实、锲而不舍的态度与精神的句子，仔细体会。• “用鲫鱼囊胚期的细胞进行人工培养，经过385天59代连续传代培养后，用直径10微米左右的玻璃管在显微镜下从培养细胞中吸出细胞核。”

• “在189个这种换核卵细胞中，只有两个孵化出了鱼苗，而最终只有一条幼鱼渡过难关，经过80多天培养后长成8厘米长的鲫鱼。” • 依靠高超的外科手术从爪蟾蝌蚪的上皮细胞、肝细胞、肾细胞中取出核，并把这些细胞的核精确地放进已被紫外线破坏了细胞核的卵细胞内。

• “经几百次灰、黑、白这样的操作以后，白色小鼠终于生下了三只小灰鼠。” • “经过247次失败之后，他们在1996年7月得到了一只名为‘多利’的克隆雌性小绵羊。

• „„用极细的吸管从卵细胞中吸出核。„„立即送入取走核的“苏格兰黑绵羊”的卵细胞中。„„然后，将胚胎巧妙地植入另一只母羊的子宫里。

七、拓展延伸

• 文章写道：“有关‘克隆人’的讨论提醒人们，科技进步是一首悲喜交集的进行曲。科技越发展，对社会的渗透越广泛深入，就越有可能引起许多有关的伦理、道德和法律等问题。”这段话该如何理解呢？

• 1．科学是一把双刃剑，既可造福人类，也可殃及人类，而且科学造福人类和殃及人类的速度、程度在同步增长，如核的发现和利用

• 2．科学的发展越来越从自然界逼近了人类本身，越来越深刻地触及人类的伦理、道德和法律以及人类心灵，如克隆人问题；