猪人工授精技术图解

2025-02-01|版权声明|我要投稿

猪人工授精技术图解(精选4篇)

1.猪人工授精技术图解 篇一

猪人工授精站技术员的岗位职责

采精员岗位职能

1、负责公猪的保健运动,每头公猪每周至少运动2次,做好运动记录。

A:每头采精公猪每周必须运动2次,后备猪每周1次。

B:冬节中午运动,夏季利用早晚运动。

C:运动时猪只必须踩踏撒满5%硫酸铜水的海绵、做好凡士林抹蹄工作,并做好运动治疗记录及当时室外温度记录。

2、负责做好公猪皮毛的梳理工作。

A:每头猪用软刷与硬刷两次刷试,每头猪每周2次。

B:夏季每头采精猪必须每周洗澡2次。

C:能够做到与猪亲善仔细观察猪的健康情况。

3、负责公猪的调教工作

。A:对于新引进公猪7.5月龄开始调教1.5—2个月内必须完成调教工作。

B:对于难调教公猪及肢蹄损伤、病猪等适当延长调教时间,采取2次调教。

C:调教时做到与猪亲善不可使用暴力。

4、负责夏季的防暑降温和冬季的防寒保温工作。

A:冬季中午暖活时适当将猪舍窗户打开通风换气1—2小时后关闭窗户。B:夏季在中午炎热时用水冲洗猪舍达到降温目的。

C:控制好冬夏水帘、空调温度及开阔思路提供建议更好的解决冬防寒夏防暑工作。

5、负责新进员工和来场学习人员的培训工作。

A:实践培训公猪的调教。

B:实践培训公猪的采精。

C:要求能够很好的将理论知识讲述给培训员。

6、负责工具的维护工作,所有用具必须摆放整齐有序。

A:及时维修坏损假猪台及采精用具。

B:根据采精情况能够完成假猪台的设计改造使之更适合采精工作。

C:能够适时提出用具购买计划。

7、负责采精室的清洁工作。

A:采精结束后用2‰高锰酸钾消毒再用清水清洗

B:每天将采精室的垃圾清除一遍。

C:每天采精室必须用紫外线灯照射2小时。

8、负责日常采精工作,能熟练采集原精,并及时送往实验室,并做好相应的记录与处理工作。

A:采精时必须用2%0高锰酸钾清洗猪的腹部再用清水清洗一次。.B:采集的精液中不可带有污物如尿液猪毛等。

C:及时做好采精记录及调整好采精计划。

9、关于问题采精公猪及时汇报及提出合理化解决建议。

A:针对一些调教困难的后备猪提出解决方案。

B:及时调整好个别采精公猪更换环境带来采精困难的工作。

C:及时汇报解决方案后的效果。

10、负责公猪舍的全面工作。

A:监督管理每周舍内外的常规消毒、生产区防疫工作。

B:负责疫苗的注射及协助猪病治疗、药物填加工作。

C:负责各种表格记录工作。负责舍外种植工作及时完成生产总管安排的各项工作,及时向生产总管汇报工作情况,并提出合理化建议。

二:饲养员岗位职能

1、所有公猪的饲养(包括公猪的治疗)、卫生、舍内外消毒、消毒池水的更换、设备的维修、抽水等,并做好相应的记录。

A:要求每周冲洗圈舍一次、消毒2次,舍外每周消毒1次。B:消毒池水每周更换一次。

C:每半月对设备检修维护一次,并填好各种记录表格。

2、负责向生产主管汇报工作情况,并提出合理化建议 A:要提前一周提出下次所需饲料购买数量。

B:及时汇报猪舍内各种情况,并能够及时解决。

C:能够完成生产主管安排的工作。

3、负责做好饲料房的卫生清洁工作。A:饲料袋摆放整齐。

B:喂料后清扫一次饲料房,地面无散撒饲料。

C:对于新到饲料及时用高锰酸钾与甲醛熏蒸消毒。

4、负责舍内用好水帘、空调,护好水帘、玻璃、猪舍栏杆的清洁卫生。

A:每周擦拭一次空调通风管道。玻璃及猪舍栏杆。

B:每两周负责维护保养一次以上设备。

C:每半月汇报一次以上设备使用状态。(适用于无意外事故发生,如有损坏等及时上报)

5、负责猪舍粪便的及时清洁,做到粪在人清的原则。

A:喂料后料前及时清粪。

B:能够做到粪便的及时清理做到猪舍内不积粪。

C:每周清理一次粪沟不可存留太多粪尿以免产生氨气。

6、负责公猪的体况看膘投料,做好耗料记录。

A:能够做到瘦猪加料,胖猪减料

B:引导饲喂如根据个别猪的爱好加些青饲料等引诱多饲。

C:每日填好耗料记录。

7、负责夏季的防暑降温和冬季的防寒保温工作。

A:冬季中午暖活时适当将猪舍窗户打开通风换气1—2小时后关闭窗户。

B:夏季在中午炎热时用水冲洗猪舍达到降温目的。C:控制好冬夏水帘、空调温度及开阔思路提供建议更好的解决冬防寒夏防暑工作。

8、负责工具的使用和维护工作,所有用具必须摆放整齐有序。

A:饲料铲、车等设备维护。

B:不可随意乱放乱摆使用工具,必须定点摆放整齐大方美观。

C:本着节俭、耐用、方便原则适时提出用具改造、购买计划。

9、随时留意猪群的健康状况,及时协助生产主管做好病猪的治疗护理工 作,及时汇报,严禁对公猪打飞针。A:对于异常发病的公猪要及时汇报。

B:对于新引进的公猪及病猪做好药物填加及治疗工作。

C:不可对病猪打飞针,注射部位要准确。

10、负责新进员工及来场学习人员的培训工作。

A:能够理论讲解猪的四季保暖防寒知识。

B:实践培训猪的饲养方法。

C:实践培训猪的调教采精方法。

三:实验室员岗位职能

1、保持实验室内的整洁、卫生。

A:每周对实验室进行一次卫生清洁。包括地板、屋顶、各种器材等。B:每天将生产垃圾及时清理。C:每天清洁一次实验室器材保持干净做到无尘。

2、及时清洁和干燥玻璃片、比色杯、采精杯、显微镜、血球计数板等常用物品和器械。

A:对于可重复利用器材如载玻片、比色皿等每天清洗一次以备下次使用。

B:每周对显微镜清洁一次,保证目镜物镜视觉清晰化。

C:本着勤俭节约原则不可对实验室器材物品过于浪费,如经检查确实不能用报生产总管批准证明。

3、负责各品种公猪的精液制作,跟踪精液的品种、耳号及生产时间。A:做好公猪精液品质检查工作,随时做好记录。B:做好精液分类和整理、日期标注工作。C:准备好足够的稀释液以备制作精液用。

4、负责实验室设备器材的维护保养,杜绝损坏实验任何设备。A:每周对实验室设备器材检修保养一次。B;及时报检报修实验室设备器材。

C:不可恶意损坏实验室设备器材,做好显微镜和电脑的使用和护理工作。

5、负责所有公猪的采精间隔与采精计划,保证各猪场精液的正常供给,把好精液质量关。

A:要求成年公猪每周采精2次,后备公猪每周必须做到采精1次。B:每天将下一次采精猪只报于办公室,并将当天所剩精液报于办公室。

C:不得随意外出,工作时间留守实验室保证散户精液发放。

6、负责实验室内相关报表与数据的记录与统计分析。A:要求完成科研数据的统计。

B;每周向生产主管递交一份所有猪只精液品质检查情况(报电脑上)。C:每周向生产主管递交一份个别猪只精液质量异常报表(报电脑上)。

7、精液稀释与分装。

A:精液稀释后活力不低于70%方可分装。B:原精畸形不能超过15%方可分装。C:死精不能超过10%方可稀释分装。

8、负责做好实验室所用药品、AI消耗品的库存和各猪场精液的发放记录,每日统计生产耗材报表于月底前交到生产总管。

A:要求每日填写一次实验室生产所用稀释粉、载玻片、稀释袋、盖玻片、移液枪头、采精袋、输精瓶、手套等耗用量记录。B:发现AI耗材质量问题必须及时汇报并做好记录。C:做好AI耗才领用记录。

9、负责新进员工及来场学习人员的培训工作。

A:对培训员讲解AI器材使用方法及实践操作。

B:对培训员讲解精液镜检、稀释方法及实践操作。C:对培训员讲解AI器材、耗才的保养、维护方法。

10、负责生产总管安排的各项工作,并向生产总管汇报实验室内的情况并提出合理化建议。

A:及时完成生产总管所交给的月报、周报、日报。B:及时对采精公猪及后备公猪提出合理化安排建议等项。C:协助生产主管完成各项工作。

长宁草畜工贸有限责任公司

2.猪人工授精技术图解 篇二

一、猪人工授精所需设备与耗材

显微镜 (恒温加热板) 、精子密度测定仪、电子天平、恒温水浴锅、恒温精液保存箱、量筒或烧杯、保温杯、pH计或pH试纸、温度计、采精杯、消毒外科用纱布、输精瓶、输精管、精液过滤纸、微量可调移液器及吸头、精子计数器、玻璃棒、一次性采精手套、一次性采精袋、蒸馏水 (建议双蒸水或超纯水) 、纸巾、成品稀释粉或配制精液稀释液所用的药品等。

二、猪的人工采精

1. 采精公猪的调教

精液采集采用公猪爬跨假台畜的方法进行。采集精液前对公猪进行调教是必要的, 尤其青年公猪。利用条件反射, 巩固公猪对采精环境的性欲反应。采精前采精人员需穿上工作服, 并进行相应的消毒;采精场地面需保持清洁, 并将防滑垫铺好, 室温保持在22~25℃;检查假台畜是否牢固、清洁, 对公猪包皮及周围的长毛、污物进行清理。初次采精精液的公猪并未建立条件反射, 需运用不同的调教方法使公猪爬跨假台畜, 主要包括隔栏学习、发情母猪尿或分泌物诱导、模仿母猪叫声诱导及发情母猪诱导等方法。切记公猪爬跨后, 必须采精。公猪初次爬跨成功后, 需密集多次调教, 以使公猪产生条件反射, 并进一步巩固。

2. 精液采集

精子对温度、渗透压及杂质的细小变化都很敏感, 用于精液处理的所有设备应清洁、消毒灭菌、干燥和保温, 避阳光直射。擦净工作台、墙面、地面, 室内空气无灰尘, 室温22~25℃。采精前2小时将精液稀释粉放入定量的双蒸水中, 混匀、充分溶解, 而后置于37℃恒温水浴锅中预热;也可提前自配精液稀释液, 然后置于37℃恒温水浴锅中预热备用。将采精袋置于采精杯中, 然后将消毒的采精滤纸折叠成漏斗形, 并置于采精杯上, 并预热处理。

采用手握法采精。一手带双层手套, 另一手持预热后的保温杯用于收集精液。先清理公猪腹部和包皮的污物, 待公猪爬跨台猪并伸出阴茎, 脱去外层手套, 用手 (大拇指与龟头相反方向) 紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头, 顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直, 握紧阴茎龟头防止其旋转。待公猪射精时用集精杯收集浓精液于保温杯内。

3. 精液品质检查

采集精液后, 及时送到实验室对精液进行处理和检查。目的在于鉴定精液品质的优劣, 以确定精液是否适用于输精及为精液的稀释提供参考, 同时检查公猪饲养水平和生殖器官的机能状态。精液的检查包括精液量、颜色、气味、精子活率、精子密度等指标。 (1) 颜色。正常的精液是乳白色或浅灰色, 呈云雾状, 精子密度越高, 色泽愈浓, 其透明度愈低。如果精液呈绿色或黄色等异样颜色, 应舍弃不用。 (2) 气味。正常猪精液略带腥味, 如有异常气味 (恶臭味, 炎症表现) , 应废弃不用。 (3) 采精量的测定, 主要有体积测定法与重量测定法两种。体积测定法, 直接用量筒 (量杯) 测定精液体积;重量测定法, 按1克精液约等于1毫升计, 精液体积 (毫升) =精液量 (克) = (精子的质量+集精杯的质量) -集精杯子的质量。重量测定法操作相对简单, 可减少体积测量过程中精子的死亡, 便于生产推广。 (4) 精子活率检查。精子活率是指精液在37℃条件下呈直线运动的精子占全部精子总数的百分率, 与精子受精能力密切相关, 是评定精液品质的重要指标。要求每次精液稀释后、输精前均应进行活率检查。精子活率的评定一般在显微镜下观察精子活率, 按0.1~1.0的十级评分法评估。检查活率时要求载玻片和盖玻片37℃预热, 鲜精活率在0.75以上才可稀释保存。 (5) 精子密度检查。精子密度指每毫升精液中含有的精子数量, 是确定精液稀释倍数、评定精液品质的重要指标。估测法, 在显微镜下观察精子的分布, 精子与精子之间的距离少于一个精子长度为“密”, 其距离相当于一个精子的长度为“中”, 大于一个精子的长度为“稀”, 此种方法主观性强、误差大, 只能进行粗略估计。精子密度仪法, 使用方便, 检查所需时间短、重复性好, 结果比较准确。血细胞计数方法, 最准确, 但速度太慢, 生产实践中主要用于校正精子密度仪的读数。 (6) 精子畸形率检查。指畸形精子占精子总数的百分率, 可用伊红或姬姆萨等染料染色后用普通显微镜观察。精子畸形种类, 包括头部畸形, 即头部巨大、瘦小、细长、圆形、双头、顶体膨胀或脱落等;颈部畸形, 即颈部膨大、纤细、屈折、不全、带有原生质滴、不鲜明、双颈等;尾部中段畸形, 即弯曲、螺旋形、回旋、短小、长大、双尾、折尾等。公猪利用过度, 饲养管理不良, 配种间隔过长, 采精操作不当或者睾丸和附睾疾病等, 均可导致畸形精子的产生。取一滴原精液作抹片 (也可用稀释后精液) , 自然干燥, 福尔马林磷酸盐固定液固定15~20分钟, 姬姆萨染液染色90分钟, 水洗后并自然风干。在显微镜下放大400~1000倍检查, 要求镜检计数≥300个精子, 记录观察到的畸形精子数和精子总数之比, 即得出畸形精子百分率。 (7) 填写精液品质检查登记表。包括公猪品种、耳号、采精时间、采精量、精子活率、精子密度、畸形率等。

三、精液稀释与分装

1. 精液稀释

对品质检查合格的精液, 采集后应尽快稀释, 原精贮存时间不宜超过30分钟。稀释时严禁太阳光直射精液, 应于较暗处操作。精液要求等温稀释, 精液与稀释液的温度相差不能超过1℃, 以精液温度为准调节稀释液的温度。稀释时, 将稀释液沿杯 (瓶) 壁缓慢加入到精液中, 然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌, 使其混合均匀。高倍稀释时, 应先进行低倍稀释 (1∶1~2) , 稍待片刻后再将余下的稀释液沿壁缓慢加入, 以防造成“稀释打击”, 一般按每个输精剂量含有效精子数30亿以上, 输精量为80毫升, 来确定稀释倍数。稀释后静置片刻再作精子活率检查, 如果稀释前后精子活率无太大变化, 即可分装、保存。

2. 精液分装

分为瓶装、管装和袋装。 (1) 瓶装精液在分装时简单方便, 易于操作, 不需购置专门的分装机, 目前生产上主要采用瓶装方法。将稀释后的精液以每80毫升为单位分装至输精瓶中, 并在瓶上标明公猪品种、耳号、生产日期、稀释液名称等。 (2) 袋装法适用于机器分装, 便于提高效率。 (3) 管装法一般适用于冷冻精液的保存, 生产上使用较少。

四、精液保存

精液保存分为常温 (17℃等) 、低温 (4℃等) 和冷冻 (-196℃) 保存等, 目前国内主要是常温17℃保存。精液常温保存的要求, 将分装完的精液置22~25℃的室温1~2小时后, 放入17℃恒温箱贮存, 避免因温度下降过快, 造成死精子数等增多。保存过程中要求每12小时将精液摇匀1次, 防止精子沉淀而引起死亡。每次摇动时, 动作要轻缓均匀, 同时观察精液的色泽状态, 并做好记录, 发现异常及时处理。保存过程中要切实注意冰箱内温度的变化 (通过温度计的显示) , 以免因意想不到的原因而造成电压不稳, 导致温度升高或降低。尽量减少精液保存箱开关次数, 减少对精子的影响。使用前对保存的精液进行活率检查, 活率低于0.75的精液弃之不用。

五、精液运输

运输过程中精液应置于保温较好的装置内, 保持16~18℃, 且要避免强烈的振动。精液在运输前必须经严格检查, 活率低于0.75的精液严禁调出。包装瓶或包装袋中应尽量排出空气, 减少在运输过程中的振动。运输过程中, 应严格避光。精液运输到达目的地后, 检查精子活率, 合格后方可输精。

六、输精

1. 输精的时间

母猪在发情后阴部红肿, 用手压背部, 出现静立反射时, 为最佳输精时间。此时许多发情母猪都有爬跨其他母猪, 或允许其他母猪爬跨的表现。也可利用公猪试情, 母猪接受公猪爬跨, 则表示发情。发情母猪出现静立反射后8~12小时进行第一次输精, 之后间隔8~12小时进行第2次输精。

2. 输精方法

输精方法主要有, 子宫颈输精法、子宫体输精法和子宫角输精法。其中, 子宫体输精法、子宫角输精法使用精液量少, 适用于冷冻精液、性控精液等, 但操作相对复杂, 需特殊的输精管。目前, 生产上主要应用子宫颈输精法, 其操作简单, 易掌握。子宫颈输精法先消毒清洁双手, 戴上消毒手套, 清洁母猪外阴、尾根及臀部周围, 再用温水浸湿毛巾, 擦净外阴部。从密封袋中取出灭菌后的输精管, 手不应接触输精管前2/3部分, 在其前端涂上润滑液。将输精管45度角向上插入母猪生殖道内, 当感觉有阻力时, 缓慢逆时针旋转, 同时前后移动, 直到感觉输精管前端被锁定 (轻轻回拉不动) ;从精液贮存箱取出品质合格的精液, 确认公猪品种、耳号, 缓慢颠倒摇匀精液, 去除瓶嘴, 接到输精管上, 轻轻压确保精液能够流出输精瓶;当输精瓶 (管、袋) 内精液排空后, 放低输精瓶 (管、袋) 约15秒, 观察精液是否回流到输精瓶, 若有倒流, 再将其输入。一个情期内实行2次输精, 可提高受胎率和产仔数。

3. 填写记录

3.猪采用人工授精好处多 篇三

2.采用人工授精,可以降低给母猪配种的劳动强度,节约配种消耗的时间。如拉猪或赶猪到较远的地方配种,多个人跟着受累不说,一般配种一次,至少来回用1 ~ 2天的时间,很容易造成母猪疲惫。疲劳过度和惊吓应激(捆绑应激更重)又可能酿成母猪生病,发病时定要打针吃药,不仅影响母猪身体健康,同时还会浪费大量时间,易给仔猪胚胎发育遗留隐患。给猪人工授精,只要打一个电话,或亲自到人工授精站说一声,即可解决母猪配种问题。

3.采用人工授精,可以避免公、母猪自然交配引起的疾病。自然交配母猪很容易感染上子宫内膜炎,公猪易患阴茎炎。如果公猪患有传染病,还会造成交叉感染。

4.采用人工授精,可以改良提高猪的瘦肉率。如三元杂交猪或多元杂交猪,一般胴体瘦肉率均可达60% ~ 70%。

5.采用人工授精,可以增强猪的抗病能力。因为人工授精是无菌操作,猪感染病菌概率较小。

6.采用人工授精,可以提高猪的生长速度。如国外的大约克夏日增重最高可达700克以上,若用来对地方猪科学改良,所产的仔猪,生长速度也比较快。

7.采用人工授精,可以增加母猪的产崽数。如人工授精,每头猪所采集的精液,都是经过化验室严格检验,精液的活力要求一般不会低于0.6,配种又是在母猪最佳排卵时间,这样非常有利于精子和卵子结合成活,相对而言,产崽也会增多。

8.采用人工授精,可以提高仔猪的成活率。因为经过人工授精所产的仔猪体质比较强,抗病能力也较好,所以成活率比较高。

9.猪的人工授精,可以减少公猪的饲养头数。如自然交配,一般1头优良的公猪,1天最多可以交配2头母猪,若1天有100头母猪同时需要配种,至少得有50 ~ 60头种公猪存栏,每头公猪每天按3.5公斤饲料供应,每公斤饲料按1.6元计算,仅饲料一项1天就需要多开支300多元,1年就得花销10多万元,开销巨大,造成浪费。若采用人工授精,100头母猪需配种,最多2头公猪就可以解决问题。这样,不仅减少了种公猪的饲养头数(1头好公猪至少也得几千元至上万元引进),并且节省了饲料,降低了繁育成本,也提高了经济效益。(江西 王一贵)

编者按:随着农村规模化养猪业的发展,开展种猪人工授精,是养猪产业引进名优猪品种提高养殖商品猪质量,降低养殖成本,从而创造更好的经济效益的有效途径。为此,农村百事通读者服务部应广大养殖户要求,继续举办种猪人工授精实用技术培训。

培训内容:种公猪选择、饲养、训练、采精方式、采精频率、精液检查、精液稀释、母猪发情鉴定、输精方法等。以上培训内容,由学员在猪场实际操作,全天训练,直至能独立从事人工授精技术工作。报名费、学费、实习费共680元,食宿自理(每天12元)。

授课时间:每月6日、16日、26日开学,常年培训。培训地点在江西的大型养猪场。

4.中药治疗人工感染猪弓形虫病试验 篇四

关键词:中药;治疗;猪弓形虫病;生物回归试验

中图分类号: S855.99 文献标志码: A

文章编号:1002-1302(2015)04-0222-02

收稿日期:2014-06-05

基金项目:宁夏农林科学院科技创新先导资金(编号:nkyj-14-20)

作者简介:王秀琴(1964—),女,宁夏平罗人,副研究员,主要从事动物疾病预防及诊断研究。E-mail:nxnkyw@163.com。

通信作者:梁小军,研究员,主要从事家畜繁殖育种和健康养殖方面的研究与示范。E-mail:Lxj0520@163.com。

弓形虫病是由弓形虫(Taxoplasma gondii)引起的一種人畜共患原虫病,人类通过接触终末宿主猫科动物和食入寄生弓形虫包囊的猪、羊、鸡等产品而感染[1-2]。人感染弓形虫病可导致孕妇流产、死胎和新生儿先天性弓形虫病等。弓形虫病是严重影响人类健康及畜牧业发展的人畜共患寄生虫病之一[3-4]。对弓形虫病的治疗,多年来一直采用螺旋霉素和磺胺类药物,这些药品仅对滋养体有效,对包囊无效[5-6]。为了寻求既能杀灭滋养体又对包囊有特效的抗弓形虫药物,我们对人工感染猪弓形虫病进行了治疗试验。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 弓形虫强毒株 试验用标准强毒虫株CN,引自中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.1.2 试验药物 试验用抗弓形虫中药及混合制剂AT10(AT:Anti-Toxoplasaa的缩写,下同),AT20、AT10+20混合制剂,由宁夏中药研究所研制。

1.1.3 试验动物 45 d健康猪,由宁夏贺兰县农牧局提供;小白鼠,体质量(20±2) g,购自宁夏自治区药品检验所。

1.2 试验方法

1.2.1 药物安全性试验[7] 注射药物后1 h内和2、4、8 h观察试验猪临床反应多次。停药后每日上下午各观察1次,连续观察3 d。无任何临床反应为安全,有一定临床反应,但能在短期内耐过为基本安全,临床反应重,甚至部分猪死亡,或较长时间方能耐过为不安全。

1.2.2 药物治疗试验[8] 弓形虫CN强毒株,采用腹腔注射攻毒试验。试验动物小白鼠,垂直传递3代以上,抽取小白鼠腹腔液,用生理盐水稀释,每头试验猪腹腔注射3 000万~3 750万个弓形虫滋养体。对照组又分强毒对照:每批试验共设1组,每组1头;药物对照:每种药物设1头;健康对照:每批试验共设1组,每组1头。治疗组按不同药物分别分为大、中、小剂量组。

1.2.3 生物回归试验 分别于攻毒后7、14 d,在AT10、AT20、AT10+203组中各随机抽样检查经药效判定认为对弓形虫滋养体有效的猪1头(共6头)剖杀,取腹水、脑、肝、脾、肠淋巴结、膈肌,按病原分离程序和方法,分别接种健鼠3只(肝、脾、淋、膈混合为1组),并分别于7、14 d盲传1代,传递3代,分别测算各生物回归试验组鼠的阳性率。

1.2.4 临床检查[9] 每天测温2次(上午体温超过40 ℃,下午超过40.5 ℃即认为升温,并以此统计稽留期),脉搏、呼吸、心、肺、眼结膜、鼻、胃肠、食欲、粪尿、体表淋巴结和精神、行动等常规观察与检查1次,检查期30 d。分别统计体温稽留小时数,并采用t测定法进行均数差异显著性分析,比较各组与强毒对照组的差异性。

1.2.5 荷虫量检查[10] 分别在投药前和临床检查结束时抽取腹水,以压片镜检法观察虫体形态、运动和活力。以白细胞计数法计算荷虫量,计算减少率。并采用χ2测定法进行差异显著性分析,比较各组与强毒对照的差异性。

减少率=(1-投药后荷虫数投药前荷虫数)×100%。

2 结果与分析

2.1 药物安全性试验

通过45头猪的药物安全性观察,获得不同药物的安全有效剂量,结果见表1。

表1 试验药物安全剂量

试验药物

大剂量 中剂量 小剂量

剂量

(mg/kg) 试验猪数

(头) 剂量

(mg/kg) 试验猪数

(头) 剂量

(mg/kg) 试验猪数

(头)

AT10 2.50 10 0.25 3 0.05 2

AT20 50.0 10 2.50 3 0.50 2

AT10+20 2.50+25.0 10 0.25+2.50 3 0.05+0.50 2

AT10以大剂量腹腔注射试验猪后,15 min内出现口涎增多、扭腰、步履蹒跚、精神迟滞等毒副反应。30 min左右明显缓解,1 h左右基本恢复正常。注射第2、第3剂后都曾出现类似反应,但未再加剧。在正式治疗试验中也未出现严重药物毒副反应,基本安全。以中剂量腹腔注射试验猪后均未见异常反应,安全性能良好。以7.5 mg/kg大剂量腹腔注射试验猪后15 min出现严重毒副反应,口吐大量白色泡沫,扭腰伸颈,后肢伸直,站立不稳,行走困难,频频起卧,肌肉震颤,精神沉郁。2 h后逐渐缓解,4~8 h基本恢复。注射第2剂后 15 min 内出现上述症状,并逐渐加剧,其中1头注第2剂后25 min死亡,另1头注第2剂后8 h基本恢复。注第3剂后仍出现类似症状,8 h左右基本康复。

nlc202309051142

AT20以大剂量腹腔注射试验猪后,15 min内出现呕吐、伸腰、行走不稳等反应。1 h左右开始缓解,2 h基本恢复,注射第2、第3剂曾出现过类似反应,但未见加剧。在正式试验中都未出现严重药物毒副反应,基本安全。以中剂量腹腔注射仔猪后,均未见任何异常反应,安全性能良好。

AT10+20以大剂量腹腔注射试验猪后,15 min内出现口涎增多、呕吐、扭腰、步履蹒跚、精神迟滞等毒副反应,15 min后毒副反应逐渐缓解,2 h左右基本恢复正常。注射第2、第3剂后,都曾出现过类似反应,但未见加剧,似无蓄积现象。以中、小剂量腹腔注射试验猪,均未见异常反应,安全性能良好。

2.2 药物治疗试验

根据药效判定标准认为以AT100.25~2.5 mg/kg治疗猪弓形虫病,对滋养体杀灭率为100%;以AT100.05 mg/kg治疗猪弓形虫病,对滋养体杀灭率为95.23%。

根据药效判定标准认为以AT200.5~50 mg/kg治疗猪弓形虫病,对滋养体杀灭率达到95%左右。

根据药效判定标准认为以AT10+20 的0.05~2.5+0.5~25 mg/kg治疗猪弓形虫病,对滋养体杀灭率为100%(表2)。

表2 不同药物治疗效果比较

试验药物 组别

荷虫量(mm3) 体温

治疗前虫数

(头)

治疗后 差异显著性

虫数(头) 减少率(%) χ2值 结果

稽留时间

(h)

差异显著性

t值 结果

AT10 大剂量 10 730 0 100 333.37 P<0.01 44.4 6.860 P<0.01

中剂量 10 634 0 100 330.37 P<0.01 68.0 4.698 P<0.01

小剂量 10 600 506 95.23 282.44 P<0.01 84.0 7.639 P<0.01

强毒对照 11 254 12 100 123.27

AT20 大剂量 9 954 512 94.85 256.06 P<0.01 44.4 21.814 P<0.01

中剂量 10 400 500 95.19 276.92 P<0.01 68.0 3.188 P<0.01

小剂量 10 900 511 95.31 283.58 P<0.01 84.0 2.276 P<0.01

强毒对照 11 254 12 100 123.27

AT10+20 大剂量 11 260 0 100 349.84 P<0.01 2.40 21.303 P<0.01

中剂量 11 534 0 100 356.84 P<0.01 36.0 6.475 P<0.01

小劑量 10 800 0 100 335.51 P<0.01 60.0 2.578 P<0.05

强毒对照 11 254 12 100 123.27

2.3 生物回归试验

由表3可知,AT10、AT10+20 对包囊有效,对包囊的杀灭率分别达到100%、98.04%。AT20对包囊无效。强毒攻击后自然耐过猪剖杀取材回归小白鼠,结果表明,第1代鼠100%典型发病并在7 d内死亡。

表3 生物回归试验阳性率结果比较

组别

回归试验小鼠阳性率(%)

7 d组 14 d组

腹水 脑 肝、脾、淋、膈 平均 腹水 脑 肝、脾、淋、膈 平均

总阳性率

AT10 0 0 0 0 0 0 0 0 0

AT20 35.71 35.71 30.77 33.33 83.33 25.00 29.17 41.67 37.25

AT10+20 0 0 0 0 8.33 8.33 0 4.16 1.96

强毒对照 100 100 100 100

3 结论与讨论

治疗弓形虫病的理想药物应能阻止感染和预防包囊形成,如已形成包囊则应破坏它或使包囊内的虫体死亡[11-12]。本试验用5种中药对人工感染猪弓形虫病进行治疗试验,通过治疗结果比较,筛选出3种治疗弓形虫病的新特效药AT10、AT20、AT10+20,其中AT10和AT10+20对弓形虫体滋养体和包囊均有强大的杀灭作用,AT20仅对弓形虫滋养体有效。AT10、AT20均系中药制剂,药源广、成本低、用量少、疗效高,相关药理机制还有待进一步研究。

参考文献:

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[3]刘九生,陈恩辉. 仔猪急性腹泻型弓形体病的治疗[J]. 四川畜牧兽医,1996(4):42-43.

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[9]肖 达. 氯苯胍对体外弓形虫的作用[J]. 中国人兽共患病杂志,1991,7(5):64.

[10]Moreno S N,Li Z H. Anti-infectives targeting the isoprenoid pathway of Toxoplasma gondii[J]. Expert Opin Ther Targets,2008,12(3):253-263.

[11]宋贤响,万红娇,杨翠萍. 中药抗弓形虫感染的研究思路与方法[J]. 江西中医学院学报,2006,18(1):76-78.

[12]游运辉,欧阳颗,向选东. 用蒿甲醚治疗实验小鼠急性弓形虫感染的研究[J]. 中国现代医学杂志,2000,10(6):35-36.

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